基于UPLC-MS/MS技术的抗利什曼病新药DNDI-6174靶向药代动力学研究

本研究针对利什曼病治疗药物匮乏的现状，开发了基于UPLC-MS/MS技术的生物分析方法，定量检测新型口服抗利什曼药物DNDI-6174在小鼠血浆及组织中的药代动力学特征。通过验证的检测方法灵敏度达0.500 ng/mL，准确度偏差≤12.0%，为临床前靶向药代动力学研究提供了可靠工具，支持该候选药物的转化医学开发。

　　

利什曼病是由利什曼原虫引起的被忽视的热带病，全球每年新增病例超过70万例。现有治疗方案存在毒性大、疗程长、耐药性等问题，亟需开发新型口服药物。DNDI-6174是一种靶向寄生虫线粒体细胞色素bc₁
复合物的吡咯并嘧啶类化合物，临床前研究显示其对内脏型和皮肤型利什曼病均具有纳摩尔级抗寄生虫活性。

为支持该药物的转化开发，来自荷兰等机构的研究团队在《Journal of Chromatography B》发表研究，建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)定量分析方法。该方法创新性地采用胶原酶A酶解均质化处理小鼠组织样本，相比机械破碎显著提高了皮肤和肝脏的药物提取效率。研究使用人K₂
EDTA血浆作为替代基质，通过优化液液萃取条件，实现了0.500-200 ng/mL的线性范围，回收率达70.0-93.8%，基质效应控制在0.89-1.00之间。

在方法学验证部分，研究人员系统评估了方法的各项性能指标。校准曲线在0.500-200 ng/mL范围内线性良好（R²
≥0.9980），LLOQ为0.500 ng/mL（信噪比>10）。日内和日间精密度RSD分别≤9.1%和≤9.5%，准确度偏差±11.4%。特别值得注意的是，该方法成功解决了组织样本分析中的三大挑战：通过酶解均质化提高硬组织（如皮肤）的药物提取效率；采用同位素标记内标(²
[H]₆
-DNDI-6174)校正基质效应；验证了药物在各种生物基质中的稳定性。

在应用研究中，该方法成功用于评估BALB/c小鼠皮肤感染模型中的靶向药代动力学。结果显示，连续10天50 mg/kg给药后，DNDI-6174在肝脏中的蓄积量最高，血浆AUC_0h-24h
从170 μg·h/mL（第1天）升高至234 μg·h/mL（第10天），消除半衰期保持稳定（约4.5小时）。组织分布数据为理解药物在主要靶器官（皮肤、肝脏和脾脏）的暴露特征提供了关键依据。

该研究的创新价值体现在三个方面：首先，建立的UPLC-MS/MS方法可直接转化用于临床研究；其次，证实酶解均质化相比传统机械破碎更适合硬组织样本处理；最后，研究揭示了DNDI-6174在感染模型中的独特药代动力学特征，包括随时间增加的系统暴露和良好的组织渗透性。这些发现不仅支持DNDI-6174作为临床候选药物的开发，也为其他抗寄生虫药物的靶向药代动力学研究提供了方法学参考。

值得注意的是，研究团队在讨论部分坦诚分享了方法开发中的经验教训。例如，在分析小鼠组织样本时观察到的内标响应下降现象，通过补充实验证实不影响定量准确性。这种严谨的科研态度增强了研究结果的可靠性。该方法的成功应用，为加速抗利什曼病新药的开发提供了重要的技术支撑。