可注射水凝胶递送CXCL13/LIGHT促进三级淋巴结构形成增强黑色素瘤免疫治疗

本研究针对肿瘤免疫治疗中患者响应率低、免疫抑制微环境等瓶颈问题，开发了基于透明质酸(HA)与葫芦[8]脲(CB[8])主客体交联的可注射水凝胶(HA-CPP???CB[8])，实现CXCL13/LIGHT的协同递送。该制剂通过单次注射显著提升B16-OVA黑色素瘤模型中三级淋巴结构(TLS)的密度与成熟度，上调抗原特异性T细胞，联合抗PD1治疗实现肿瘤完全消退。该研究为构建合成免疫生态位支架提供了新策略，发表于《Journal of Controlled Release》。

　　

肿瘤免疫治疗的困境与突破
当前免疫检查点阻断(ICB)疗法虽取得进展，但受限于肿瘤免疫抑制微环境，患者响应率不足20%。三级淋巴结构(TLS)作为"抗肿瘤免疫指挥中心"，能通过B细胞/T细胞/抗原呈递细胞(APC)的协同作用增强免疫应答，但其在肿瘤内的自发形成率极低。如何人工诱导功能性TLS成为突破免疫治疗瓶颈的关键科学问题。

香港大学的研究团队创新性地将材料科学与免疫学交叉融合，设计出基于透明质酸-葫芦[8]脲(HA-CPP???CB[8])主客体相互作用的自修复水凝胶。该载体通过单次注射实现CXCL13（B细胞趋化因子）与LIGHT（淋巴毒素超家族成员）的持续释放，在B16-OVA黑色素瘤模型中成功诱导出具有生发中心的成熟TLS，联合抗PD1治疗使40%小鼠获得长期生存。这项发表于《Journal of Controlled Release》的研究，为合成免疫生态位设计提供了全新范式。

关键技术方法
研究采用动态交联技术构建可注射水凝胶，通过核磁共振(¹
H NMR)验证宿主-客体复合物形成；采用流变学测试表征剪切稀化和自愈合性能；建立B16-OVA黑色素瘤腹腔移植模型，通过免疫荧光定量TLS密度；采用ELISPOT检测脾细胞干扰素-γ(IFN-γ)分泌；流式细胞术分析T细胞亚群。

主要研究发现
3.1 水凝胶递送系统的开发与表征
通过CPP-NH₂
与HA的酰胺化反应合成HA-CPP，与CB[8]以2:1摩尔比形成动态交联网络。该水凝胶在1%应变下储能模量(G′)达500Pa，临界交联频率0.1rad/s，支持2天内缓释0.6μg CXCL13/LIGHT。

3.2 体内抗肿瘤效果验证
单次注射载药水凝胶使原发肿瘤面积缩小61%（35.2 vs 90.8mm²
），显著优于游离药物组。治疗组脾细胞OVA特异性IFN-γ分泌增加3倍，证实系统性免疫激活。

3.3 成熟TLS的诱导机制
免疫组化显示治疗组TLS密度达0.45个/mm²
，其中80%呈现Ki67⁺
生发中心结构。CD11c⁺
APC浸润增加2.5倍，提示抗原提呈功能增强。

3.4 联合治疗的协同效应
水凝胶联合抗PD1使肿瘤完全消退率提升至40%，TLS密度进一步增至0.556个/mm²
。流式显示肿瘤内CD8⁺
T细胞比例升高至35%，显著高于对照组。

科学价值与临床启示
该研究首次证实物理交联水凝胶可模拟淋巴器官微环境，其创新性体现在：1）通过CXCL13/LIGHT时空协同释放破解TLS诱导难题；2）动态交联网络支持单次注射替代多次给药；3）为"冷肿瘤"免疫治疗提供材料学解决方案。局限性在于小鼠TLS形态学差异需通过人源化模型验证，未来可通过组织透明化技术实现TLS三维重构。这项研究为下一代免疫治疗制剂开发奠定了关键技术基础。