动脉内顺铂灌注对离体马肢蹄背侧壁组织的损伤效应及潜在蹄叶炎风险研究

本研究针对马匹蹄癌治疗中反复使用顺铂(Cisplatin)的安全性问题，通过离体马肢灌注模型评估动脉内顺铂(14 mg/600 ml)对蹄背侧壁组织的损伤效应。结果显示短期顺铂暴露虽未改变表皮小叶形态，但显著削弱基底膜层粘连蛋白(Laminin)染色强度(p=0.005)，提示存在诱发蹄叶炎(Laminitis)风险，为临床治疗方式选择提供重要依据。

　　

马匹蹄癌（Hoof canker）作为一种慢性增生性蹄部疾病，其治疗过程漫长且复发率高。传统手术清创联合顺铂（Cisplatin）局部给药虽能降低复发率，但频繁更换敷料时接触这种高危药物对医护人员构成风险。受人类肿瘤动脉内化疗启发，维也纳兽医大学的研究团队创新性地采用离体马肢灌注模型，首次系统评估了动脉内顺铂对健康蹄组织的影响，相关成果发表于《Journal of Equine Veterinary Science》。

研究采用13匹无跛行马匹的离体前肢，其中9肢接受含顺铂（23.3 μg/ml）的血液-血浆灌注液20分钟灌注，随后进行6小时持续灌注。通过H&E染色、层粘连蛋白（Laminin）免疫组化和Ki-67增殖标记等关键技术，结合线性混合模型统计分析，揭示了短期顺铂暴露对蹄背侧壁组织的特异性损伤模式。

【3.1 供体动物】实验选用6母马、3种马和4阉马（平均年龄11.9±7.7岁），体质量250-750kg，确保样本代表性。

【3.2 表皮小叶评估】顺铂组与对照组在初级表皮小叶（PEL）形态分类、总长度（TELL）和角化长度（KPELL）上无显著差异，次级表皮小叶（SEL）的形态学参数也未受影响，提示顺铂未引发典型蹄叶炎结构改变。

【3.3 基底膜层粘连蛋白染色】关键发现显示顺铂组基底膜层粘连蛋白染色强度显著减弱（p=0.005）：54%样本呈弱阳性，而对照组仅12%。血管壁强染色证实实验有效性，表明顺铂特异性破坏基底膜完整性。

【3.4 Ki-67阳性细胞】两组在表皮基底细胞增殖数量上无统计学差异，排除顺铂刺激细胞异常增殖的可能性。

讨论部分深入剖析了顺铂通过干扰葡萄糖代谢影响基底膜的潜在机制。与碳水化合物超载或高胰岛素血症诱导的蹄叶炎不同，本研究发现顺铂导致的基底膜损伤更类似能量代谢障碍模型。值得注意的是，离体模型缺乏活体负重可能掩盖了基底膜分离等晚期病变，但层粘连蛋白染色减弱已构成蹄叶炎的明确风险信号。

该研究具有双重意义：方法学上验证了离体灌注模型用于蹄部药物安全性评估的可行性；临床上则明确反对动脉内顺铂治疗蹄癌的临床应用，为开发新型靶向给药系统（如脂质体包裹）提供理论依据。未来研究可探索超分子载体（Suprasomes）等精准递送技术，在确保疗效的同时规避全身毒性风险。