解毒活血汤通过p53/SRC-ERK/AKT通路调控脂代谢治疗顺铂诱导急性肾损伤的整合药理学研究

本研究针对急性肾损伤(AKI)缺乏特效疗法的临床困境，采用网络药理学-分子对接-代谢组学整合策略，揭示经典方剂解毒活血汤(JHD)通过调控CD36介导的脂肪酸摄取及p53/SRC-ERK/AKT信号通路改善脂代谢紊乱的分子机制，为中药复方治疗AKI提供全新靶点与科学依据。

　　

研究背景
急性肾损伤(AKI)是临床常见的危重症，住院患者发病率高达20%，重症监护病房甚至达50%。这种以肾功能急剧恶化为特征的疾病，不仅导致氮代谢废物堆积，还与慢性肾病(CKD)、终末期肾病(ESRD)的高死亡率密切相关。令人担忧的是，目前临床上仍缺乏针对AKI的特效药物。顺铂作为常用化疗药，其肾毒性导致的AKI更是肿瘤治疗中的棘手难题。

传统中药复方因其多成分、多靶点的协同作用，在复杂疾病治疗中展现出独特优势。源自清代《医林改错》的解毒活血汤(JHD)，由连翘、葛根、北柴胡等10味中药组成，经国医大师张琪临床验证对AKI疗效显著，但其作用机制如同"黑箱"亟待破解。现代研究发现，JHD组方药材多具有调节鞘磷脂、甘油磷脂等脂代谢的作用，而肾脏作为高代谢器官，其近端肾小管上皮细胞(PTECs)的代谢稳态与AKI发生发展密切相关。这提示我们：JHD是否通过调控肾细胞代谢发挥治疗作用？

研究方法
广东省中医院的研究团队创新性地采用"干湿结合"研究策略：

1. 网络药理学筛选JHD的184个活性成分和394个作用靶点
2. 分子 docking 验证关键成分(槲皮素、木犀草素等)与核心靶点(TP53、SRC等)的结合活性
3. 建立顺铂诱导AKI小鼠模型，通过生化检测、组织病理学评估药效
4. qPCR、Western blot、免疫荧光等技术验证p53/SRC-ERK/AKT通路
5. 非靶向代谢组学分析脂代谢变化

研究结果

活性成分与潜在靶点识别
通过TCMSP数据库筛选获得207个候选成分，经OB>30%、DL≥0.18标准过滤后，确定184个活性成分(如槲皮素、木犀草素)和394个潜在靶点。疾病数据库分析发现AKI相关靶点1023个，与JHD靶点取交集获得127个关键靶点。

PPI网络与通路分析
蛋白互作(PPI)网络拓扑分析鉴定出TP53、SRC、MAPK1等7个核心靶点。GO功能富集显示JHD主要影响脂质代谢过程，KEGG通路分析显著富集于p53、ERK/AKT等信号通路。分子对接显示槲皮素与TP53(-8.7 kcal/mol)、木犀草素与SRC(-9.2 kcal/mol)具有强结合力。

体内药效验证
顺铂模型组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)显著升高(P<0.01)，而JHD治疗组指标明显改善。肾组织HE染色显示JHD减轻了肾小管空泡变性、管型形成等病理损伤。

机制解析
qPCR和Western blot证实JHD显著下调p53、CD36表达(P<0.05)，抑制SRC-ERK/AKT通路活化。免疫荧光显示JHD减少肾组织中性脂质沉积。代谢组学发现JHD逆转了顺铂引起的鞘磷脂(如SM(d18:1/16:0))、磷脂酰胆碱(PC(16:0/18:2))等代谢物异常。

结论与意义
该研究首次系统阐明JHD通过"多成分-多靶点-多通路"协同作用治疗AKI的机制：核心活性成分(槲皮素等)靶向调控p53/SRC-ERK/AKT信号轴，抑制CD36介导的脂肪酸摄取异常，纠正鞘磷脂、甘油磷脂等代谢紊乱，从而改善肾小管损伤。这不仅为中药复方现代化研究提供"网络药理学-分子对接-代谢组学"整合研究范式，更发现p53/SRC可作为AKI脂代谢调控的新靶点，为开发基于"代谢重编程"的AKI治疗策略奠定理论基础。

论文创新性地将中医"活血解毒"理论与现代代谢调控理论相结合，发表于《Journal of Ethnopharmacology》，为中医药国际化提供高质量证据。研究获得国家自然科学基金(82374356等)、广东省中医院拔尖人才项目(BJ2022KY16)等多方支持，体现产学研结合的转化医学价值。