基于Nrf2/HO-1通路与鞘脂代谢调控的菊睛方对肝肾阴虚型视网膜损伤的保护机制研究

【编辑推荐】针对干性年龄相关性黄斑变性（AMD）缺乏有效疗法的临床困境，南京中医药大学团队通过建立肝肾阴虚视网膜损伤（LKYD-RD）小鼠模型，揭示传统复方菊睛方（JJF）通过激活Nrf2/HO-1抗氧化通路、调控神经酰胺/鞘氨醇-1-磷酸（S1P）代谢平衡，显著改善视网膜结构与功能。该研究为中医药治疗干性AMD提供了分子层面的科学依据。

　　

在全球老龄化加剧的背景下，年龄相关性黄斑变性（AMD）已成为致盲的首要病因，其中干性AMD占晚期患者的90%，却缺乏像抗VEGF治疗湿性AMD那样的有效手段。视网膜色素上皮细胞（RPE）功能障碍和光感受器凋亡是核心病理特征，而传统中医理论将其归因于"肝肾阴虚、精血亏虚"。南京中医药大学团队从经典明目方剂菊睛方（JJF）入手，这项发表于《Journal of Ethnopharmacology》的研究，首次系统揭示了JJF通过多靶点调控改善干性AMD的分子机制。

研究采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS）解析JJF的75种活性成分，并创新性构建了结合甲状腺素灌胃、夹尾应激和碘酸钠注射的肝肾阴虚视网膜损伤（LKYD-RD）复合小鼠模型。通过光学相干断层扫描（OCT）、TUNEL染色、血清代谢组学和Western blot等技术，多维度验证JJF的治疗效果。

研究结果

1. 模型构建与表型验证
   通过检测血清T₃
   /T₄
   水平、肾上腺指数及肾脏病理变化，证实LKYD-RD模型成功模拟了阴虚证候。JJF治疗组显著降低促炎因子IL-1β
   、IL-6和TNF-α
   水平，同时提升超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）活性。

2. 视网膜保护作用
   OCT显示JJF使视网膜外层核层厚度增加47%，H&E染色证实其减少光感受器细胞丢失。TUNEL阳性细胞数下降62%，伴随Bcl2/Bax比值上调及cleaved-Caspase 3表达抑制。

3. Nrf2/HO-1通路激活
   免疫荧光显示JJF组Nrf2核转位增加3.8倍，Western blot检测到HO-1蛋白表达提升210%，证实其通过抗氧化通路减轻RPE氧化损伤。

4. 鞘脂代谢调控
   代谢组学发现JJF逆转了模型组异常的神经酰胺（Cer）、鞘氨醇（Sph）及鞘氨醇-1-磷酸（S1P）水平。分子实验显示JJF下调促凋亡蛋白Cers2/Cers6，同时促进Sphk1磷酸化，维持S1P/Cer平衡。

结论与意义
该研究阐明JJF通过"双通路协同"机制发挥作用：一方面激活Nrf2/HO-1信号缓解氧化应激，另一方面通过调节鞘脂代谢关键酶（如Asah1、Sgpp1）维持神经酰胺/S1P动态平衡。这不仅为中医药"肝肾同源"理论提供了现代科学诠释，更发现鞘脂代谢网络可能是干性AMD治疗的新靶点。研究采用的LKYD-RD复合造模方法，也为中医证候动物模型研究提供了范式参考。