丹参乙醇提取物通过抑制STAT3通路抑制黑色素瘤生长并诱导自噬的双重机制研究

【编辑推荐】针对晚期黑色素瘤治疗困境，香港浸会大学团队开展丹参乙醇提取物（DSE）抗肿瘤机制研究，发现其通过抑制STAT3磷酸化及核转位，阻断下游Cyclin D1/Bcl-2表达，同时激活保护性自噬，在体外和异种移植模型中显著抑制肿瘤生长。该研究为传统中药现代化抗肿瘤应用提供分子依据。

　　

黑色素瘤虽仅占皮肤癌的4%-5%，却是导致皮肤癌死亡的主因，全球年新增病例约32.5万例。尽管靶向治疗和免疫疗法取得进展，转移性患者中位生存期仍不足10个月，凸显开发新疗法的紧迫性。STAT3作为关键致癌通路，在60%以上黑色素瘤中持续激活，但其抑制剂面临毒性大、特异性差等挑战。香港浸会大学研究人员从传统中药丹参（Salvia miltiorrhiza）中提取乙醇提取物（DSE），系统探究其对黑色素瘤的作用机制。

研究采用MTT法、EdU标记、划痕实验、Transwell侵袭实验等技术评估DSE对A2058/A375细胞增殖、迁移的影响；通过Western blot、免疫荧光检测STAT3通路关键蛋白；利用RFP-GFP-LC3双荧光系统和自噬抑制剂（氯喹/3-甲基腺嘌呤）解析自噬调控机制；建立异种移植模型验证体内效果。网络药理学预测JAK2/STAT3为潜在靶点。

【Danshen Extract (DSE) Suppresses Cell Proliferation in Human Melanoma Cells】
MTT实验显示DSE以浓度依赖性抑制黑色素瘤细胞活力（400-800 μg/mL时抑制率>80%），EdU检测证实20-60 μg/mL DSE可降低DNA合成率50%以上。流式细胞术揭示DSE诱导G₀
/G₁
期阻滞，伴随Cyclin D1/CDK2下调。

【STAT3通路调控机制】
DSE剂量依赖性降低STAT3 Tyr⁷⁰⁵
磷酸化水平（60 μg/mL时减少70%），抑制STAT3核转位。过表达STAT3C质粒可部分逆转DSE的抗增殖作用，证实STAT3是核心靶点。Western blot显示下游靶标Cyclin D1、Bcl-2表达显著下调，促凋亡蛋白Bax上调。

【自噬与STAT3的交互作用】
双荧光系统显示DSE处理增加LC3-II转化率，自噬体积累。联合自噬抑制剂氯喹（CQ）使细胞死亡率提升2.3倍，表明DSE通过抑制STAT3解除其对自噬的抑制作用，触发保护性自噬。

【体内实验验证】
异种移植模型中，DSE（100 mg/kg/天）治疗21天使肿瘤体积缩小58%，免疫组化显示瘤组织STAT3磷酸化水平降低，LC3B表达升高。

结论部分指出，DSE通过双重机制发挥抗黑色素瘤作用：直接抑制STAT3介导的增殖/转移通路，同时解除STAT3对自噬的抑制，形成"促死亡-抑保护"协同效应。该研究首次将丹参传统活血化瘀功效与STAT3靶向治疗联系起来，为开发低毒多靶点抗黑色素瘤中药制剂奠定基础。讨论强调，DSE中丹参酮与丹酚酸的协同作用可能优于单一STAT3抑制剂，未来需开展成分分离与临床转化研究。论文发表于《Journal of Ethnopharmacology》，通讯作者为香港浸会大学Jingzhi Zhang团队。