综述：硫化氢阴性沙门氏菌及其对标准培养鉴定方法的影响

这篇综述系统探讨了硫化氢(H2 S)阴性沙门氏菌的生物学特性及其对传统培养鉴定方法的挑战，提出了整合非H2 S依赖性检测技术（如显色培养基）与分子筛查的改进方案，为食源性病原体监测提供了重要参考。

　　

硫化氢阴性沙门氏菌：传统鉴定方法的挑战与突破

Abstract
典型沙门氏菌通过产生硫化氢(H₂
S)在选择性培养基上形成黑色沉淀，这一特征长期作为实验室诊断的关键指标。然而H₂
S阴性菌株的出现对传统分离方案构成挑战，本文系统综述了这类菌株的表型变异、分子机制及检测策略。

Introduction
作为肠杆菌科的重要成员，沙门氏菌的H₂
S产生能力与硫代谢途径密切相关。近年全球多国报告显示，H₂
S阴性菌株可逃避依赖黑色沉淀的传统检测，这些菌株常携带抗生素耐药基因，甚至引发暴发事件。

Identified Operons Significant for H₂
S Production
沙门氏菌通过三个关键操纵子调控H₂
S合成：

• phs操纵子（41.5分钟染色体位点）：编码硫代硫酸盐还原酶
• asr操纵子（53分钟位点）：介导亚硫酸盐还原
• cysJIH操纵子：参与硫酸盐同化途径
  其中phsA基因突变（如C→T无义突变）是导致H₂
  S缺失的主要因素。

Role of the phs Operon
土耳其、中国等地的研究发现，phsA基因第1621位点的点突变可产生终止密码子，使82.7kDa的PhsA蛋白失活。有趣的是，某些环境因素（pH波动、盐度变化）可能诱导此类突变，但具体机制仍需验证。

Salmonella Isolation Based on H₂
S Production
传统培养基（XLD/HE/BS）依赖硫代硫酸铁反应产生黑色沉淀，但存在明显局限：
• 高盐食物样本可能抑制H₂
S表达
• 缓慢生长菌株需延长培养至48小时
• 变形杆菌等干扰菌可产生假阳性

Chromogenic Media for Salmonella Culture
显色培养基通过水解特异性底物实现检测，优势显著：

• Rambach培养基：利用丙二醇代谢产酸
• SMID培养基：基于葡萄糖醛酸代谢
• CHROMagar：使所有沙门氏菌（包括H₂
  S阴性株）形成品红色菌落

Emerging Reports of H₂
S-negative Serovars
2013-2020年全球至少发现18个血清型，包括：
• 中国：伤寒沙门氏菌（携带gyrA突变）
• 瑞典：单相鼠伤寒沙门氏菌（引发番茄相关暴发）
• 葡萄牙：禽源哈瓦那沙门氏菌（耐头孢噻肟）

Public Health Significance
临床分离株中已发现105株H₂
S阴性菌，其公共卫生重要性体现在：

1. 与H₂
   S阳性株共存于同一患者
2. 携带bla_CMY-2
   等耐药基因
3. 可经食物链传播引发跨区域暴发

Future Directions
改进方案建议：
① 平行使用XLD与CHROMagar
② 预增菌后加入CRISPR-SeroSeq筛查
③ 采用磁珠富集等新型前处理技术
美国农业部最新指南已纳入分子初筛步骤，显着提升检出率。

Conclusion
整合多组学技术的"培养-分子"联用策略，将有效解决H₂
S阴性株的检测难题。未来需重点研究phs操纵子突变的环境诱导机制及其对菌株适应性的影响。