原人参二醇通过靶向MLK3激活JNK信号通路诱导黑色素瘤细胞凋亡的机制研究

本研究针对黑色素瘤治疗耐药与复发的临床难题，揭示了天然产物原人参二醇（PPD）通过直接靶向混合谱系激酶3（MLK3）激活JNK/c-Jun通路诱导凋亡的新机制。研究人员采用网络药理学预测结合CETSA靶点验证技术，发现PPD特异性结合MLK3的LEU248位点，触发MAPK级联反应，显著抑制SK-MEL-28等细胞活力。该研究为开发基于PPD的黑色素瘤靶向治疗策略提供了理论依据。

　　

黑色素瘤作为最具侵袭性的皮肤恶性肿瘤，其高转移性和治疗抵抗性导致患者预后极差。尽管靶向治疗和免疫治疗取得进展，但耐药复发仍是临床面临的重大挑战。传统中药人参的主要活性成分——原人参二醇（Protopanaxadiol, PPD）已被证实具有广谱抗肿瘤活性，但其在黑色素瘤中的作用机制尚未阐明。这项由国内研究团队发表在《Journal of Ginseng Research》的研究，首次系统揭示了PPD通过特异性靶向MLK3激酶激活JNK凋亡通路的关键机制。

研究团队采用MTT法、流式细胞术等评估细胞活力与凋亡，结合网络药理学预测关键靶点，通过Western blot验证信号通路，并运用CETSA和分子对接技术确认PPD与MLK3的直接相互作用。此外，采用位点定向突变技术精确定位结合位点。

研究结果显示：PPD以剂量时间依赖性方式显著抑制SK-MEL-28等黑色素瘤细胞活力，IC₅₀
达60 μM。网络药理学分析预测MAPK通路是PPD的核心作用靶点，其中JNK通路激活被证实是诱导凋亡的关键环节——JNK抑制剂SP600125可完全逆转PPD促凋亡效应。机制上，PPD在30分钟内特异性激活MLK3（而非ASK1/TAK1），并直接结合MLK3的LEU248保守位点，该结合通过CETSA热稳定性实验和分子对接（pKi=6.22）得到验证。MLK3过表达可增强PPD对JNK/c-Jun通路的激活及促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase 3等的表达。值得注意的是，ROS清除剂NAC不能阻断PPD效应，证实其作用不依赖氧化应激。

该研究创新性发现PPD是MLK3的直接变构激活剂，阐明了"PPD-MLK3-JNK-凋亡"的级联调控轴。这不仅为PPD抗黑色素瘤的临床应用提供了理论支撑，更揭示了MLK3可作为新型抗肿瘤靶点。研究者特别指出，尽管PPD存在口服生物利用度低的药代缺陷，但通过结构优化或剂型改良，其衍生物有望成为克服黑色素瘤耐药的治疗新选择。这项研究为开发基于天然产物的精准抗肿瘤策略提供了重要范式。