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阳江豆豉微生物群落与特征风味化合物的相关性研究:揭示发酵食品风味形成的关键机制
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月06日 来源:Journal of Future Foods CS5.8
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为解决传统发酵豆豉风味形成机制不明确、微生物与风味物质关联性研究不足的问题,研究人员通过MiSeq测序和HS-SPME-GC-MS技术,系统分析了阳江豆豉发酵过程中微生物群落演替与33种关键风味化合物的动态变化。研究发现,以Millerozyma spp.和Bacillus spp.为代表的优势菌群与酯类(果香/花香)及苯乙醛(花香)等风味物质显著正相关,首次揭示了酵母菌群在豆豉后发酵阶段对特征风味形成的主导作用,为发酵食品质量控制和新发酵剂开发提供了理论依据。
豆豉作为亚洲传统发酵食品,其独特风味深受消费者喜爱,但长期以来存在两大科学难题:一是半开放发酵环境下微生物群落与风味物质的关联机制不明确,二是优势菌种对特征风味形成的具体贡献缺乏系统研究。这些问题导致豆豉产品质量不稳定,制约了工业化发展。尤其对于阳江豆豉这类Aspergillus型豆豉,尽管已知其发酵过程涉及芽孢杆菌、酵母菌和曲霉等多菌种协同,但各菌群在风味形成中的具体作用仍如"黑箱"。
为解决这些问题,广东阳帆食品有限公司的研究人员开展了为期30天的追踪研究,采集了制曲(1/3/5天)、洗曲(6天)和后发酵(10/20/30天)共7个阶段的样本。通过整合高通量测序、挥发性成分分析和多元统计方法,首次绘制了阳江豆豉发酵过程的微生物-风味-理化性质三维关联图谱。该研究发表在《Journal of Future Foods》上,为发酵食品风味调控提供了新视角。
研究主要采用三大关键技术:1)Illumina MiSeq PE300平台进行16S rRNA(细菌)和ITS(真菌)测序;2)顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(HS-SPME-GC-MS)检测141种挥发性化合物;3)通过Spearman相关性分析、冗余分析(RDA)和Mantel检验构建微生物-环境-风味网络。样本来自工业化生产的三个独立发酵批次,确保数据可靠性。
微生物群落动态分析显示,细菌OTU数量(1062个)显著高于真菌(114个),且优势菌群呈现阶段性更替:制曲阶段Weissella spp.占主导(74.5%),后发酵阶段Bacillus spp.(52.55%)和Millerozyma spp.(41.79%)成为核心菌群。值得注意的是,Aspergillus spp.在洗曲阶段占比高达96.22%,但后发酵期其地位被酵母菌取代。
挥发性成分分析发现,后发酵阶段酯类物质增加15种,其中乙酸乙酯(1992.47 μg/kg)和苯甲酸乙酯(388.63 μg/kg)贡献突出的果香。关键气味活性值(OAV≥1)化合物达33种,正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选出18种标志性风味物质,包括呈现花香的苯乙醇(VIP=1.21)和具有烟熏味的4-乙基-2-甲氧基苯酚(VIP=1.15)。
相关性网络揭示:酵母菌群(Millerozyma/Candida/Kodamaea spp.)与苯乙醛(R=0.89)、2-十一酮(R=0.85)等花果香物质显著正相关;而Aspergillus spp.则与蘑菇味的1-辛烯-3-酮(R=0.82)正相关。理化性质分析表明,总酸和氨基酸氮含量与后发酵阶段微生物群落呈强相关性(Mantel test,p<0.01),证实环境因子驱动菌群演替。
该研究突破性发现在于:1)首次明确多种酵母菌是阳江豆豉后发酵阶段风味形成的关键驱动菌,其通过促进酯化反应提升果香/花香物质含量;2)揭示Bacillus spp.与Streptophyta spp.的协同作用能增强奶油香和坚果香;3)建立"微生物-环境-风味"三元调控模型,为定向改良发酵工艺提供靶点。这些发现不仅解释了传统豆豉风味的科学本质,更为开发标准化发酵剂、提升发酵食品品质提供了理论支撑。尤其值得注意的是,研究鉴定出的Millerozyma farinosa等酵母菌株,未来或可通过合成菌群技术应用于其他发酵食品的风味优化。
讨论部分强调,该研究存在的局限性在于未对关键菌株进行纯培养验证,且工业化生产环境与实验室条件的差异可能影响菌群功能。未来研究可结合宏基因组学进一步解析代谢通路,并通过人工接种实验验证特定菌株的风味贡献。这些成果为传统发酵食品的现代化转型树立了典范,也为微生物资源在食品工业中的应用开辟了新思路。
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