基于计算模拟与实验验证的Labisia pumila叶提取物促进伤口愈合的分子机制研究

本研究针对传统抗菌剂细胞毒性及耐药性问题，通过体外实验和分子对接技术，首次系统评估了马来西亚Labisia pumila（LP）两种变种叶提取物对皮肤细胞的作用。结果显示LP叶提取物在1.5-3.1 μg/ml浓度下显著促进成纤维细胞（194000 ± 3623 cells/cm2 ）和角质形成细胞（275578 ± 14959 cells/cm2 ）增殖，其活性成分鞣花酸衍生物与GSK3-β（糖原合成酶激酶3-β）结合能达-12 kcal/mol，为天然伤口愈合剂开发提供新思路。

　　

在当代医疗实践中，伤口处理面临双重挑战：一方面，传统抗菌剂如吖啶黄（acriflavine）存在显著细胞毒性，15.6 μg/ml即可导致成纤维细胞死亡；另一方面，微生物耐药性日益严重，李斯特菌等甚至能在低于推荐浓度的消毒剂中存活。更棘手的是，长期使用消毒剂可能引发接触性皮炎和皮肤染色。这些困境促使科学家将目光转向天然药物，如马来西亚传统产后恢复草药Labisia pumila（LP，又称Kacip Fatimah）。

马来西亚国立大学的研究团队在《Journal of Herbal Medicine》发表的研究中，首次将计算生物学与细胞实验相结合，系统评估了LP两种常见变种（var. alata和var. pumila）的叶和根提取物对伤口愈合的影响。研究发现，LP叶提取物中的活性成分能通过调控GSK3-β（glycogen synthase kinase 3-β）等关键靶点，显著加速皮肤细胞再生，其效果远超传统抗菌剂，且无细胞毒性。这项研究不仅验证了马来传统医学的科学性，更为开发新型伤口敷料提供了分子层面的理论依据。

研究采用三大关键技术：① 从马来西亚Bujang Melaka森林保护区采集的LP样本经水提法制备提取物；② 使用人原代皮肤成纤维细胞和角质形成细胞进行增殖（MTT法）和迁移（伤口划痕实验）检测；③ 通过AutoDock Vina对LP主要植物化学成分与GSK3-β进行分子对接。

【植物提取物制备】
研究人员采用标准化水提工艺，确保提取物保留LP的活性成分。值得注意的是，200 μg/ml以上的根提取物对所有测试浓度均显示细胞毒性，而叶提取物在1.5 μg/ml（成纤维细胞）和3.1 μg/ml（角质形成细胞）的优化浓度下表现出最佳活性。

【细胞增殖效应】
对比未处理对照组，LP叶提取物使成纤维细胞密度提升至194000 ± 3623 cells/cm²
，角质形成细胞达275578 ± 14959 cells/cm²
（P < 0.05）。这种促增殖作用可能源于LP的植物雌激素特性，其分子机制类似于雌激素受体调节剂。

【细胞迁移能力】
伤口愈合实验显示，叶提取物处理组的成纤维细胞迁移率达14791.5 ± 1615.6 μm²
/h，角质形成细胞达20438 ± 2206 μm²
/h，显著高于对照组。这种效应与LP已知的抗炎和抗氧化特性密切相关。

【分子对接分析】
通过计算模拟发现，LP中的鞣花酸衍生物与GSK3-β结合能最低（-12 kcal/mol），表明其可能通过抑制该激酶来促进伤口愈合。GSK3-β是Wnt/β-catenin通路的关键负调控因子，其抑制可加速上皮再生。

这项研究的突破性在于首次揭示LP叶提取物的双重作用机制：既通过植物雌激素特性直接刺激细胞增殖，又通过抗氧化成分（如鞣花酸）间接调控GSK3-β信号通路。值得注意的是，虽然LP根提取物在早期研究中显示较强的抗炎活性（抑制一氧化氮生成），但本实验证实其临床应用存在浓度限制。研究人员建议未来研究应聚焦于：① LP活性成分的纯化与结构修饰；② 动物模型验证；③ 开发缓释敷料以优化给药方案。这些发现为天然药物在现代创伤治疗中的应用提供了重要范式转换。