一步法免疫层析技术同步鉴别诊断猴痘与水痘：高灵敏度双指标检测体系的建立

针对猴痘（mpox）与水痘（chickenpox）临床鉴别困难的问题，研究人员开发了一种基于双抗体夹心法的双指标免疫层析试纸条（ICA），可同步检测猴痘病毒AR抗原（0.125 ng/mL）和水痘病毒gE抗原（0.25 ng/mL），10-15分钟快速判读，与PCR检测结果无统计学差异。该研究为基层医疗机构提供了一种高灵敏度、高特异性的即时检测（POCT）工具。

　　

猴痘（mpox）与水痘（chickenpox）这对“双生花”近年来给全球公共卫生带来严峻挑战。两者临床症状高度相似——发热、皮疹、肌痛，甚至存在混合感染病例，但病原体却截然不同：猴痘病毒（属正痘病毒属）与水痘带状疱疹病毒（VZV）分属不同病毒科。2024年世界卫生组织（WHO）再次将猴痘列为“国际关注的公共卫生紧急事件”，而水痘仍是全球儿童高发传染病。传统PCR检测虽准确，但依赖专业设备且耗时长，基层医疗机构亟需一种“傻瓜式”快速鉴别工具。

中国某研究机构团队在《Journal of Immunological Methods》发表的研究，开创性地将双指标检测系统集成于一条胶体金试纸条上。研究人员通过制备针对猴痘病毒重组抗原AR（A29L/A35R/A6R串联表达）和水痘病毒gE蛋白的特异性单克隆抗体（MAbs），构建了双T线检测系统：T1线捕获AR抗原-胶体金复合物，T2线捕获gE抗原-胶体金复合物，C线（对照线）采用羊抗鼠IgG抗体确保检测有效性。关键技术包括胶体金纳米颗粒（34 nm）标记抗体、硝酸纤维素膜抗体定点固定及临床样本验证（56例）。

【Characterizations of the colloidal gold and colloidal gold-MAbs conjugates】
透射电镜（TEM）显示胶体金及抗体偶联物呈均匀球形，紫外吸收峰稳定在524 nm，为后续检测提供理想信号载体。

【Sensitivity of the ICA strips】
灵敏度测试显示，AR抗原最低检测限达0.125 ng/mL，gE抗原为0.25 ng/mL；混合抗原检测时双T线互不干扰，证实系统稳定性。

【Methodology comparison】
与PCR方法对比检测56例临床样本，符合率100%，Kappa值0.92，证实其临床适用性。

该研究突破传统单一指标检测局限，首次实现“一卡双检”。试纸条在室温保存35天后性能无衰减，操作无需专业培训，特别适合偏远地区早期筛查。作者团队在讨论中指出，该技术可拓展至其他共患病鉴别诊断领域，如登革热与寨卡病毒联检。值得注意的是，研究中采用的AR抗原三基因串联表达策略，较单一蛋白检测显著提升灵敏度，为未来多表位检测提供新思路。论文结论强调，这种“双T线”设计兼具时间分辨荧光法的精准性与胶体金法的便捷性，有望成为传染病防控的“口袋实验室”。（作者：Laiqing Li、Qiang Jia等；通信作者：Cuicui Chen）