延迟血培养上机对细菌检出率及检测时间的影响：基于40万份样本的多中心回顾性研究

本研究针对英国微生物学调查标准(SMI)要求的血培养4小时内上机时限是否影响检出率这一临床争议问题，通过分析西南英格兰4家医院398,077份血培养数据，发现每延迟1小时上机导致0.3%的检出率下降，其中化脓性链球菌(S. pyogenes)等链球菌属受影响最大(OR 0.97)，而厌氧菌和真菌未见影响。研究为优化血培养流程提供了重要循证依据。

　　

在急诊和重症监护领域，血培养始终是诊断菌血症的金标准，但其敏感性不足的问题长期困扰临床。英国微生物学调查标准(SMI)建议血培养样本应在采集后4小时内上机孵育，这一时限要求主要基于缩短检测周转时间(TAT)的考虑，但对检出率(Yield)的影响尚缺乏大规模临床验证。更令人困惑的是，有研究甚至发现提前孵育可能降低检出率，这种矛盾现象亟待澄清。西南英格兰病理学网络的研究团队为此开展了迄今最大规模的血培养流程评估研究。

研究团队收集了2017-2023年间4家医院(含2家三级转诊中心)的449,191套血培养数据，最终纳入398,077套完整数据。采用BD BACTEC FX40全自动培养系统，通过混合效应贝叶斯回归模型分析上机时间(TTL)对检出率和检测时间(TTD)的影响。关键技术包括：1)多中心回顾性队列设计；2)基于ward/hospital的嵌套混合效应模型；3)广义加性模型探索非线性关系；4)病原体特异性分析(区分21,330例致病菌和15,925例污染菌)。

【描述性统计】数据显示平均TTL为4.07小时，9.36%培养阳性。急诊科阳性率最高(13-15%)，但不同站点的TTL差异显著，如Site 4急诊平均TTL仅1.15小时，凸显地理位置对样本运输的影响。

【检出率分析】调整ward效应后，每延迟1小时上机导致0.3%的检出率下降(OR 0.997)。非调整模型显示0-4小时检出率急剧下降，但混合模型证实为线性关系。值得注意的是，化脓性链球菌(S. pyogenes)受影响最大(OR 0.97)，延迟4小时可能导致20%的检出损失。肺炎链球菌(S. pneumoniae)的快速自溶特性可能解释其敏感性。

【检测时间分析】每延迟1小时上机，培养系统内孵育时间缩短10.03分钟(95%CrI 12.66-7.31)，表明细菌在运输过程中已有缓慢生长。但所有菌种的总体检测时间(TTP=TTL+TTD)仍随延迟而延长。

【病原体特异性】大肠杆菌(E. coli)是最常见病原体(6,261例)，而厌氧菌(629例)和真菌(518例)的检出率不受TTL影响。β-溶血性链球菌(包括S. agalactiae等)均显示TTL敏感性。

讨论指出，虽然整体检出率影响微弱(0.3%/小时)，但对化脓性链球菌等关键病原体的显著影响具有重要临床意义。该菌导致的侵袭性感染需要特异性抗生素治疗，漏诊可能导致治疗延误和公共卫生风险。研究首次为SMI的4小时时限提供了部分支持证据，但建议特别关注链球菌检出优化。方法学上，通过嵌套混合模型有效消除了ward地理位置带来的偏倚，这是较既往研究的重要进步。

该研究发表在《Journal of Infection》，其发现对实验室流程优化具有指导价值，特别是对儿童和免疫抑制患者等采血困难人群。虽然血容量等因素对检出率影响更大，但针对特定病原体的时效性管理仍值得关注。未来研究需要进一步阐明链球菌在延迟上机过程中的生物学行为变化机制。