RNAi介导的held-out wing(HOW)基因沉默抑制白背飞虱翅展的分子机制及防控应用

【字体: 时间:2025年06月06日 来源:Journal of Insect Physiology 2.3

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  为应对白背飞虱(Sogatella furcifera)抗药性问题,研究人员通过RNAi技术靶向沉默翅发育关键基因held-out wing(HOW),发现SfHOW通过调控SfAp-Dpp通路影响翅展,导致62%成虫翅卷曲及66.8%死亡率,为RNAi农药开发提供新靶点,推动半翅目昆虫翅发育分子机制研究。

  

白背飞虱(Sogatella furcifera)是亚洲水稻产区的主要迁飞性害虫,不仅通过吸食汁液直接危害作物,还传播南方水稻黑条矮缩病毒等病原体。当前化学农药的过度使用导致其对噻虫嗪、吡虫啉等药物产生抗性,亟需开发新型绿色防控策略。昆虫翅发育是决定其迁飞能力的关键环节,而翅展过程涉及多基因调控网络。已有研究表明,在果蝇中,held-out wing(HOW)基因通过KH结构域调控肌肉、心脏及翅发育,但其在半翅目昆虫中的功能尚未明确。

贵州民族大学等机构的研究人员通过克隆SfHOW基因(628 bp,编码196 aa),发现其在3龄若虫和表皮组织中高表达。RNAi沉默SfHOW后,成虫翅卷曲率达62%,死亡率达66.8%,并伴随SfAp和Dpp基因表达显著下调。研究表明SfHOW可能通过调控SfAp-Dpp通路参与翅展,为RNAi农药设计提供了新靶标。相关成果发表于《Journal of Insect Physiology》。

研究采用以下关键技术:1)基于转录组数据(SRP116252)克隆SfHOW序列;2)实时荧光定量PCR(qPCR)分析时空表达谱;3)体外合成dsRNA进行RNAi干扰;4)表型观察与死亡率统计;5)关键通路基因(SfAp、Dpp)表达量检测。

主要研究结果

  1. SfHOW基因克隆与表达特征
    序列分析显示SfHOW与褐飞虱(Nilaparvata lugens)同源性达90.69%,在3龄若虫表达量最高,表皮组织中富集,暗示其在翅发育中的功能保守性。

  2. RNAi沉默的表型效应
    dsSfHOW注射后,靶基因转录水平显著降低,成虫翅无法正常伸展(折叠卷曲率62%),证实SfHOW是翅展的必要调控因子。

  3. 分子机制解析
    SfHOW沉默导致SfAp和Dpp表达下调,提示其可能通过Hippo-Wg/Dpp通路调控翅形态建成,与果蝇中HOW抑制Dpp 3'UTR的机制相呼应。

结论与意义
该研究首次揭示SfHOW通过调控SfAp-Dpp轴参与白背飞虱翅展,为靶向翅发育的RNAi农药研发提供了理论依据。相较于传统化学农药,靶向HOW的dsRNA具有物种特异性高、环境兼容性好等优势。此外,研究拓展了对半翅目昆虫翅发育分子网络的认识,为其他迁飞性害虫的防控策略设计提供了参考。未来需进一步验证HOW与MAPK/ERK磷酸化的关联,以及其在田间条件下的实际防控潜力。

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