基于早期传代生长的快速药敏试验（RAST）在阳性血培养瓶中的应用评估：缩短抗生素治疗决策时间的关键突破

本研究针对血流感染（BSI）患者抗生素治疗决策延迟的临床痛点，创新性地评估了阳性血培养瓶（PBCB）早期传代（4/8/24 h）生长菌落的快速药敏试验（RAST）性能。研究人员通过比较标准24 h培养与早期传代菌落的药敏结果发现：革兰阴性杆菌（GNB）在4 h传代后4 h读数即可获得可靠RAST结果，而铜绿假单胞菌等需8 h传代，葡萄球菌属则需24 h传代。该方法将传统48-96 h的检测周期缩短至8-28 h，为脓毒症患者的精准抗生素治疗提供了重要技术支撑。

　　

在重症监护病房中，每延迟一小时使用正确抗生素，脓毒症患者的死亡率就会上升9%——这个触目惊心的数据揭示了当前血流感染（BSI）诊断体系的致命短板。传统抗生素敏感性试验（AST）需要48-96小时才能出结果，医生们不得不在"盲猜"中开出广谱抗生素处方，这种无奈之举既加剧了抗生素耐药危机，又让患者暴露在治疗失败的风险中。正是在这样的背景下，Sanjay Gandhi医学研究生院的Nidhi Tejan团队在《Journal of Microbiological Methods》发表了一项开创性研究，他们开发的早期传代快速药敏检测方案，或将改写血流感染的诊疗规则。

研究团队采用多时间点平行对照设计，对阳性血培养瓶（PBCB）进行4/8/24小时三级传代培养，随后分别在不同时间点（4/8/24 h）读取盘扩散法（disk diffusion）药敏结果。关键创新点在于突破性地验证了不同菌属所需的最短传代时间：大肠埃希菌等革兰阴性杆菌（GNB）仅需4小时传代培养，而铜绿假单胞菌等非发酵菌需要8小时，葡萄球菌属等革兰阳性球菌（GPC）则需完整24小时传代。样本来自164个阳性血培养瓶，最终161株单菌株纳入分析，其中GNB占84.4%（136/161），GPC占15.5%（25/161）。

【Material and methods】
研究在印度Sanjay Gandhi医学研究生院微生物学系开展，采用EUCAST推荐的RAST改良方案。阳性血培养瓶经革兰染色确认后，平行接种三组平板分别培养4/8/24小时，每个时间点的平板再分别进行4/8/24小时药敏读数。所有结果以CLSI标准判读，重点评估早期传代与标准24小时培养结果的一致性。

【Results】
研究揭示出显著的菌属差异性：埃希菌属、克雷伯菌属等肠杆菌科细菌在4小时传代+4小时读数即可获得>90%的准确率；而假单胞菌属需要8小时传代+4小时读数；最顽固的金黄色葡萄球菌等必须24小时传代。特别值得注意的是，该方法成功规避了直接血培养法可能出现的混合菌干扰问题。

【Discussion】
这项研究首次系统建立了不同病原菌的RAST"时间地图"，其临床价值在于：对GNB主导的感染（占BSI绝大多数），可将TAT从96小时压缩至8小时；而对GPC感染，也能提前24小时获得结果。研究者特别强调，该方法仅需常规微生物实验室设备，在资源有限地区更具推广价值。

【Conclusion】
该方案通过精准时空调控，实现了RAST技术的普适性优化。相比直接血培养法，早期传代策略既保证了单菌落纯度，又大幅提前了药敏报告时间。在抗生素耐药形势严峻的当下，这种"时间就是生命"的技术突破，为落实抗生素精准使用策略提供了关键技术支持。未来研究可进一步探索自动化接种与数字图像判读的结合，有望将TAT缩短至不可思议的4小时窗口。