利用构巢曲霉MW732187生物防治番茄腐烂病原菌链格孢MW970059：从绿色厨余废弃物中发掘新型生防菌株

本研究针对化学杀菌剂耐药性及环境污染问题，通过筛选73株真菌分离株，发现从腐烂柑橘皮中分离的构巢曲霉(Aspergillus nidulans) MW732187对番茄腐烂病原菌链格孢(Alternaria alternata) MW970059具有显著拮抗作用，体外抑制率达66.66%，其无细胞上清液(CFS)的EC50 为1%，FT-IR分析揭示含酚类、脂质等活性成分。体内实验显示该菌株使番茄采后腐烂率降低41.34%，为开发新型生物农药提供重要依据。

　　

番茄作为全球重要经济作物，其生产长期受到链格孢(Alternaria alternata)引起的采后腐烂威胁，造成重大经济损失。传统化学杀菌剂虽能控制病害，但耐药性发展和环境毒性问题日益突出。在此背景下，研究人员从绿色厨余废弃物中发掘新型生物防治剂，探索可持续农业解决方案。

摩洛哥国家农业科学院团队在《Journal of Natural Pesticide Research》发表的研究中，通过系统筛选获得一株具有显著拮抗活性的构巢曲霉(Aspergillus nidulans) MW732187。该菌株对番茄病原菌链格孢MW970059展现多重抑制机制：体外抑制率达66.66±0.25%，引起菌丝肿胀、液泡化等形态异常；其无细胞上清液(CFS)的EC₅₀
为1%(v/v)，甲醇提取物抑菌活性最强(61.39%)；FT-IR分析揭示活性成分含酚类、脂质及蛋白质类物质。田间模拟实验显示，该菌株使番茄果实病斑直径减少41.34%，为开发新型生物农药奠定基础。

关键技术方法包括：1) 采用Rapilly技术从染病番茄分离病原菌；2) 通过双重培养法筛选73株真菌分离株；3) 运用光学显微镜观察菌丝互作形态；4) ITS测序进行分子鉴定；5) FT-IR光谱分析代谢物功能基团；6) 体内果实接种实验评估防效。

【研究结果】

1. 病原菌分离与鉴定：通过形态学和ITS序列分析(登录号MW970059)确认病原菌为链格孢，人工接种7天后番茄出现典型黑斑症状。

2. 拮抗菌筛选：从腐烂柑橘皮分离的构巢曲霉B6(登录号MW732187)抑制效果最佳，形成明显抑菌带(4.03±0.058 cm vs 对照11±1 cm)。

3. 抑菌机制研究：显微观察显示链格孢菌丝出现顶端爆裂等异常，CFS处理组EC₅₀
   为1%时抑制率50.97±0.85%，6%浓度时达90.18%。

4. 活性成分分析：甲醇提取物在1657 cm^-1
   (酰胺I带)和2950 cm^-1
   (脂质CH₃
   )处特征峰显著，推测酚类和蛋白质是主要活性物质。

5. 体内防效验证：预处理组10天后病斑直径较对照减少41.34%(35±5.00 cm vs 59.67±4.51 cm)。

【结论与意义】
该研究首次证实构巢曲霉MW732187对番茄链格孢病的防治潜力，其多重作用机制包括：1) 产生非挥发性抑菌物质；2) 引起病原菌形态学损伤；3) 含酚类/蛋白类活性成分。相比已有报道的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)26%抑制率，该菌株66.66%的抑制效果更具应用前景。研究为开发基于微生物次级代谢产物的新型生物农药提供理论依据，对减少化学农药依赖、推动可持续农业具有重要意义。后续需进一步纯化活性化合物并开展田间试验，以评估其商业化潜力。