临床样本分离的浅黄奈瑟菌(Neisseria perflava)通过抑制病毒复制降低呼吸道细胞流感病毒感染

本研究针对口腔共生菌如何直接影响病毒感染免疫应答的科学空白，聚焦浅黄奈瑟菌(Neisseria perflava)等6种奈瑟菌属细菌，通过分离唾液样本、制备细菌培养上清液预处理呼吸道上皮细胞，发现N. perflava的10-30 kDa蛋白组分可显著抑制流感病毒、SARS-CoV-2和鼻病毒(HRV)的基因组复制，且不影响病毒入侵效率或细胞因子分泌。该研究为口腔菌群调控呼吸道病毒感染的机制提供新见解，发表于《Journal of Oral Biosciences》，对开发基于口腔微生态管理的抗病毒策略具有重要价值。

　　

在人类与呼吸道病毒的持久战中，口腔这个"细菌大本营"的角色一直充满谜团。虽然高通量测序技术已揭示口腔菌群的复杂构成，但这些共生菌如何直接调控病毒感染仍知之甚少。尤其令人困惑的是，临床观察发现规范口腔护理可降低流感发病率，但具体是哪些细菌在发挥作用？京都府立医科大学的研究团队将目光投向了口腔中的奈瑟菌属——这个包含23个物种的细菌家族中，除脑膜炎奈瑟菌(N. meningitides)和淋病奈瑟菌(N. gonorrhoeae)外，多数成员的功能仍是未解之谜。

研究团队从6例排除感染性疾病患者的唾液中分离出6种奈瑟菌，包括两种未定种(Neisseria sp.1/2)。通过制备细菌培养上清液预处理HEp-2细胞和正常人牙龈成纤维细胞(HGF)，结合流感病毒A型(H1N1)感染模型，发现N. perflava和另一未鉴定奈瑟菌的上清液能显著降低病毒复制量。超滤分级实验显示，10-30 kDa的蛋白组分是起效关键。值得注意的是，这种抗病毒作用具有广谱性，对SARS-CoV-2和人类鼻病毒(HRV)同样有效，且不依赖干扰素通路——病毒入侵效率和细胞因子分泌均未受影响。

关键技术包括：唾液样本的奈瑟菌分离与16S rRNA基因系统发育分析、细菌培养上清液的超滤分级(10/30 kDa截留膜)、流感病毒空斑形成试验(PFU)定量病毒复制、实时定量PCR(qPCR)检测病毒基因组拷贝数。

【Some Neisseria culture supernatants that did not cause cytotoxicity induced reduction of the influenza viral replication】
通过构建奈瑟菌系统发育树和基因组相似性分析，证实6株分离菌均为口腔原生菌。细胞毒性实验筛选出N. perflava等2株菌的无毒上清液，可使流感病毒滴度下降>50%。

【Discussion】
研究首次揭示特定口腔共生菌通过分泌蛋白直接增强呼吸道上皮细胞的抗病毒能力。与链球菌属(S. oralis)促进病毒释放的神经氨酸酶作用相反，N. perflava展现独特的病毒复制抑制功能，暗示口腔菌群存在"促病毒-抗病毒"双向调控网络。

【Conclusion】
该发现为"口腔-呼吸道"免疫轴提供分子证据，N. perflava分泌的10-30 kDa蛋白可能通过激活宿主抗病毒基因(如IFITMs)干扰病毒复制。鉴于老年人群易感流感与口腔菌群失调的相关性，研究为开发靶向口腔微生态的感染预防策略奠定基础。论文通讯作者T.N.强调，未来需解析活性蛋白的具体成分及其与宿主互作的信号通路。