基于氧化还原响应型紫杉醇二聚体纳米前药联合中药芪萸散龙方增效肺癌化学免疫治疗的策略研究

肺癌治疗面临化疗效率低和免疫抑制微环境两大难题。研究人员创新性地构建了氧化还原响应型紫杉醇(PTX)二聚体纳米前药(diPTX-2Se/S/C NPs)，联合传统中药芪萸散龙方(Q)开展协同治疗。结果表明，diPTX-2Se NPs在肿瘤细胞内特异性释放PTX，Q通过下调PD-L1表达、增加CD4+ /CD8+ T细胞比例和促进M2→M1巨噬细胞极化重塑免疫微环境，在Lewis肺癌(LLC)模型中展现出显著协同疗效。该研究为中西医结合肿瘤治疗提供了新范式。

　　

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，传统化疗药物紫杉醇(PTX)虽广泛应用，但存在肿瘤靶向性差、毒副作用大等问题。更棘手的是，PTX会上调肿瘤细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)表达，形成免疫抑制微环境，严重限制疗效。纳米前药技术和免疫治疗的发展为突破这一困境带来希望，但如何实现药物精准释放与免疫微环境调控的协同仍是重大挑战。

安徽中医药大学的研究团队创新性地将氧化还原响应型纳米前药与传统中药相结合。他们设计合成了三种PTX二聚体前药(PTX-SeSe-PTX、PTX-SS-PTX和PTX-CC-PTX)，通过自组装构建纳米颗粒(diPTX-2Se/S/C NPs)，并联合临床验方芪萸散龙方(Q)开展研究。该成果发表在《Journal of Pharmaceutical Analysis》上，证实这种中西医结合策略能同时实现高效化疗和免疫微环境重塑。

研究采用纳米沉淀法制备前药NPs，通过动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)表征理化性质；利用高效液相色谱(HPLC)分析药物释放行为；通过CCK-8法评估细胞毒性；建立LLC荷瘤小鼠模型，采用活体成像(IVIS)观察NPs体内分布；通过流式细胞术(FCM)和Western blot分析免疫细胞亚群及PD-L1表达。

3.1. PTX前药NPs的制备与表征
研究人员以3,3'-二硒二丙酸等为连接臂合成三种前药，经核磁共振(¹
H-NMR)和高分辨质谱(HR-MS)验证结构。DLS显示diPTX-2Se NPs粒径109.3 nm，zeta电位-29.4 mV，TEM证实其球形形态。分子对接表明PTX-SeSe-PTX结合能(-4.2 kcal/mol)最优，体外释放实验证实其在10 mM DTT/H₂
O₂
条件下能高效释放PTX。

3.2. 细胞毒性及摄取
CCK-8实验显示diPTX-2Se NPs对LLC细胞的IC₅₀
低至0.25 nM，且联合Q后毒性进一步增强。共聚焦显微镜(CLSM)和流式细胞术证实NPs主要通过内吞途径进入细胞，Q的加入不影响其摄取效率。

3.3. 体内分布与抗肿瘤效果
药代动力学显示NPs的AUC_0-24h
比游离药物提高3倍。在LLC荷瘤小鼠中，diPTX-2Se NPs在肿瘤部位富集量最高。高剂量(10 mg/kg PTX)治疗时，diPTX-2Se NPs+Q组肿瘤抑制率达82%，Western blot显示Q使PD-L1表达降低60%。

3.4. 小肿瘤模型的低剂量疗效
当PTX剂量降至5 mg/kg时，diPTX-2Se NPs+Q组仍展现显著优势：肿瘤体积最小，CD8⁺
T细胞比例提高2.3倍，M1型巨噬细胞占比从15%升至42%，证实免疫微环境有效重塑。

3.5. 大肿瘤模型的高剂量疗效
对300 mm³
的大肿瘤，联合治疗组肿瘤重量较对照组减少76%，H&E染色显示广泛坏死，TUNEL检测凋亡率提高4倍，且未出现明显毒性反应。

该研究首次将氧化还原响应型PTX纳米前药与中药免疫调节剂有机结合。diPTX-2Se NPs利用肿瘤高GSH/H₂
O₂
微环境实现精准释药，而Q通过多靶点调控逆转免疫抑制，两者协同攻克了化疗药物促PD-L1表达的世界性难题。特别值得注意的是，研究采用"低剂量验证协同效应，高剂量挑战晚期肿瘤"的双模型设计，为转化医学研究提供了范例。这种中西医整合策略不仅为肺癌治疗开辟了新途径，更为纳米药物与传统医学的结合提供了理论依据和实践模板。