基于金属游离PEEK色谱柱的LC-MS/MS方法开发：妊娠期OATP1B内源性探针胆汁酸-O-硫酸盐的动态监测与临床意义

本研究针对妊娠期有机阴离子转运多肽(OATP1B)活性评估的临床难题，开发了一种基于聚醚醚酮(PEEK)涂层金属游离色谱柱的LC-MS/MS方法，实现了血浆中胆汁酸-O-硫酸盐（GLCA-S和GCDCA-S）的快速精准检测。该方法克服了传统金属色谱柱导致的峰拖尾问题，在10分钟内完成分析，符合ICH M10指南要求。研究发现妊娠中期GLCA-S浓度显著高于晚期和产后，提示OATP1B活性随妊娠进展降低，为无创评估妊娠期药物转运体活性提供了安全可靠的新策略。

　　

在临床药理学领域，有机阴离子转运多肽(OATP1B)作为肝脏重要的药物转运体，其活性变化直接影响他汀类、血管紧张素受体阻滞剂等常用药物的代谢。妊娠期女性由于生理状态的特殊性，OATP1B活性可能发生显著波动，但传统评估方法依赖具有胚胎毒性的外源性探针（如瑞舒伐他汀），存在重大安全隐患。更棘手的是，胆汁酸-O-硫酸盐这类潜在内源性探针的分析面临技术瓶颈——传统不锈钢色谱柱中金属离子与硫酸基团的配位作用会导致严重的峰拖尾现象，影响检测灵敏度与重现性。

针对这一系列挑战，日本学术振兴会(JSPS)资助的研究团队在《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》发表了创新性解决方案。研究人员采用聚醚醚酮(PEEK)涂层金属游离色谱柱结合LC-MS/MS技术，建立了妊娠女性血浆中3-O-硫酸化甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA-S)和3-O-硫酸化甘氨石胆酸(GLCA-S)的同步定量方法。研究纳入了妊娠不同阶段及产后女性的血浆样本，通过优化乙腈浓度至37%实现10分钟内高效分离，并采用稳定同位素标记的内标(GCDCA-S-d₅
和GLCA-S-d₄
)保证定量准确性。

分离与选择性
色谱分析显示GCDCA-S在3.2分钟出现双峰，经纯品验证确认为人血浆中存在的同质异构体。方法学验证证实线性范围25-1500 ng/mL，精密度RSD<15%，完全符合ICH M10指南要求。

妊娠期动态变化
纵向监测发现GLCA-S浓度在妊娠中期达峰值(95.7 ng/mL)，显著高于晚期(39.3 ng/mL)和产后(44.4 ng/mL)(P=0.05)，而GCDCA-S变化无统计学差异。这一现象提示OATP1B转运活性可能随妊娠进展而下降，为理解妊娠相关药代动力学改变提供了新视角。

该研究的突破性在于：首次通过金属游离色谱技术解决了极性化合物分析的行业难题，避免了传统方法中甲基二膦酸等添加剂引起的离子抑制效应；建立了首个适用于妊娠人群的OATP1B活性无创评估体系，规避了他汀类探针的胚胎风险。研究提出的"内源性生物标志物动态监测"理念，为特殊人群的个体化用药提供了创新研究范式，具有重要的转化医学价值。未来可进一步探索该方法在药物-药物相互作用评估和剂量调整中的应用潜力。