血浆来源细胞外囊泡蛋白质组学解析：揭示急性卒中病理生理机制的新视角

本研究通过蛋白质组学技术分析血浆来源细胞外囊泡(EVs)的蛋白质组成，成功区分健康对照、大血管闭塞性缺血性卒中(LVO IS)、出血性卒中等不同卒中亚型，发现炎症、补体激活和凝血相关蛋白的关键作用，为卒中分型诊断和病理机制研究提供了新型生物标志物。

　　

卒中作为全球第三大死因，其急性期的精准分型与病理机制解析一直是临床难题。当前依赖神经影像学的诊断方式存在时效性限制，而不同卒中亚型（如大血管闭塞性缺血性卒中LVO IS、小血管病变、出血性卒中）需要差异化的治疗方案。细胞外囊泡(EVs)因其携带母细胞特异性生物分子且能跨越血脑屏障的特性，成为研究卒中病理过程的理想载体。来自瑞士日内瓦大学等机构的研究团队在《Journal of Proteomics》发表论文，首次通过蛋白质组学技术系统分析了多种急性卒中亚型的EVs蛋白质特征。

研究采用尺寸排阻色谱法(SEC)从150μL血浆中分离EVs，结合纳米颗粒追踪分析(NTA)、透射电镜(TEM)和Western blot进行表征验证。利用数据非依赖采集质谱(DIA-MS)对60例样本（含10例健康对照、10例LVO IS、10例非LVO IS等）进行蛋白质组分析，并通过偏最小二乘判别分析(PLS-DA)建立分类模型。

研究结果部分：

1. EV表征验证：NTA显示EVs粒径峰值约100nm，Western blot证实CD9、Flotilin-1等EV标志物富集，而血浆高丰度蛋白如白蛋白(ALB)被有效去除。质谱分析发现EVs特有蛋白220种，包括血小板活化相关蛋白WDR1、MPIG6B。

2. 卒中亚型区分：PLS-DA模型成功区分三组：健康对照组（特征蛋白HRG等与血小板形成相关）、严重卒中组（LVO IS和出血性卒中，含补体成分C9、血管细胞粘附分子VCAM1等炎症相关蛋白）、非LVO IS组（以凝血酶原CPB2、纤溶调节蛋白SERPINA10为特征）。

3. 功能分析：GO富集显示健康组蛋白主要参与凝血调控；严重卒中组显著富集补体激活和免疫应答通路；非LVO IS组则与纤维蛋白溶解调控密切相关。

讨论指出，EVs蛋白质谱能反映卒中急性期的核心病理过程：严重卒中伴随显著的补体激活和血管炎症，而非LVO IS以凝血-纤溶系统失调为主。该发现为理解卒中异质性提供了分子层面证据，其中ADAMTS13（血管性血友病因子裂解蛋白酶）等蛋白可能成为治疗靶点。研究创新性地证实小体积血浆EVs蛋白质组分析的临床可行性，为开发快速分型诊断工具奠定基础。

局限性包括样本量较小和急诊采样条件限制，但研究首次系统比较了多种卒中亚型的EVs蛋白质特征，其发现的生物标志物组合有望指导临床决策，并为开发针对卒中后炎症和凝血异常的靶向治疗提供新思路。