弓形虫细胞骨架高免疫原性蛋白的免疫蛋白质组学鉴定及其疫苗开发潜力

本研究针对弓形虫疫苗开发瓶颈，通过免疫蛋白质组学结合生物信息学分析，系统鉴定了弓形虫细胞骨架中313种抗原蛋白（IgM识别63种，IgG识别250种），筛选出含B/T细胞表位的高免疫原性候选蛋白，为设计新型抗弓形虫病疫苗提供了关键分子靶点。

　　

弓形虫病是一种全球性寄生虫病，人类感染率与饮食习惯、环境因素密切相关。当弓形虫速殖子侵入宿主体内后，会触发由Toll样受体(TLR)介导的天然免疫应答，随后CD4⁺
和CD8⁺
T细胞分泌的干扰素-γ(IFN-γ)成为防御关键。然而，寄生虫通过形成组织包囊逃避免疫清除，导致慢性感染。现有疫苗策略（如减毒活疫苗、重组蛋白疫苗）仅能提供部分保护，因此从弓形虫细胞骨架中发掘新型免疫原成为突破方向。

墨西哥国家 Polytechnic 研究所的 Noé Lagunas-Cortés 团队在《Journal of Proteomics》发表研究，采用免疫蛋白质组学结合生物信息学方法，首次系统鉴定了弓形虫细胞骨架中能被急/慢性期患者血清识别的抗原蛋白。通过质谱分析鉴定出313种蛋白质（IgM识别63种，IgG识别250种），其中19种为已知细胞骨架蛋白（如微管蛋白、丝状网络蛋白）。进一步通过表位预测筛选出含B细胞表位、CD8⁺
和CD4⁺
T细胞表位的高免疫原性候选分子。

关键技术包括：1）弓形虫RH株速殖子细胞骨架的Triton X-100分离与透射电镜(TEM)验证；2）二维电泳结合急/慢性期患者血清的免疫印迹分析；3）质谱鉴定与生物信息学表位预测（包括抗原性指数、跨膜结构域分析）。

【研究结果】

1. 细胞骨架分离与表征：TEM显示分离的细胞骨架保留完整超微结构，包括锥体(conoid)、亚膜微管(subpellicular microtubules)等特征组分。
2. 抗原蛋白鉴定：IgG抗体特异性识别10种细胞骨架蛋白（如动力蛋白激活蛋白DYNACTIN），IgM识别9种（如微管相关蛋白）。
3. 免疫原性分析：筛选出含多个B/T细胞表位的候选抗原，其中3种蛋白同时具有CD8⁺
   和CD4⁺
   T细胞表位。

【结论与意义】
该研究首次揭示弓形虫细胞骨架蛋白的免疫识别谱，其中微管相关蛋白和动力蛋白等可能通过TLR通路激活免疫应答。发现的候选抗原在动物实验中已显示保护潜力（前期研究使小鼠脑包囊负荷降低88.02%），为开发兼具预防感染和阻断包囊形成的多价疫苗奠定基础。未来需通过重组表达验证这些蛋白在致死剂量攻毒模型中的保护效力。