内皮NADPH氧化酶5通过性别依赖性机制促进血栓形成并改变血栓成分的研究

本研究针对NADPH氧化酶家族(NOXs)成员NOX5在血栓形成中的作用机制展开探索。研究人员通过构建内皮特异性表达人NOX5的转基因小鼠模型，结合FeCl3 诱导的颈动脉血栓模型，首次揭示NOX5通过性别差异途径（雌性通过PGE2 分泌/内皮黏附分子调控，雄性通过中性粒细胞激活）促进血栓形成，并证实抗氧化剂NAC和泛NOX抑制剂ML090的抗血栓效果，为靶向NOX5的抗血栓治疗提供理论依据。

　　

血栓形成是心脑血管疾病的核心病理环节，尽管已知NADPH氧化酶家族(NOXs)参与该过程，但关于NOX5亚型的作用机制长期存在认知空白。现有研究多聚焦于NOX1-4，而NOX5因人类特异性表达模式（啮齿类动物天然缺失）导致研究受限。这一知识缺口严重制约了靶向氧化酶系统的抗血栓药物开发。

为破解这一难题，研究人员构建了内皮特异性表达人NOX5的转基因小鼠模型，通过创新性整合多维度研究手段，系统阐释了NOX5促血栓作用的分子机制。该成果发表于《Journal of Thrombosis and Haemostasis》，首次揭示NOX5通过性别依赖性双路径调控血栓形成的全新范式。

研究采用三大关键技术：1）内皮特异性NOX5转基因小鼠的FeCl₃
诱导颈动脉血栓模型；2）血栓组织的定量蛋白质组学分析；3）跨尺度验证体系（体内功能实验、体外细胞实验、离体组织实验）。样本来源于基因工程小鼠的性别匹配群体。

【结果部分】
背景：确立NOX5在内皮血栓调控中的未知作用
通过比较转基因鼠与对照鼠的血栓形成动力学，首次证实内皮NOX5过表达显著加速颈动脉闭塞（p<0.01），且存在雌雄差异：雌性血栓形成速度提升2.1倍，雄性提升1.7倍。

方法：多组学解析血栓成分
蛋白质组学揭示性别特异性分子特征：雌性血栓中前列腺素E₂
(PGE₂
)相关蛋白上调3.2倍，血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达增加；雄性血栓则富含髓过氧化物酶(MPO)和中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)成分。

结果：机制解析
雌性机制：NOX5通过环氧化酶-2(COX-2)途径促进PGE₂
分泌（ELISA检测升高4.5倍），激活EP3受体上调内皮P-选择素表达。
雄性机制：NOX5增强循环中性粒细胞活性（流式检测CD11b表达增加2.3倍），促进NETs释放。干预实验显示N-乙酰半胱氨酸(NAC)和ML090（泛NOX抑制剂）均可显著延缓血栓形成（闭塞时间延长58%）。

结论：NOX5作为血栓调控新靶点
研究首次确立内皮NOX5是血栓形成的性别差异性调控枢纽，其下游信号网络（雌性PGE₂
/黏附分子轴 vs 雄性中性粒细胞/NETs轴）为精准抗血栓治疗提供新策略。特别值得注意的是，ML090的保护效应提示靶向NOX5或可规避现有抗血小板药物的出血风险。

该研究的突破性在于：1）创建NOX5研究的新动物模型；2）发现氧化应激调控血栓的性别二态性；3）验证NOX5抑制剂的治疗潜力。这些发现不仅填补了NOXs与血栓关系的理论空白，更为开发基于患者性别特征的个人化抗血栓方案奠定基础。