双酚Z通过METTL3-m6A-Camkk2通路抑制成年雄性大鼠睾丸间质细胞功能的机制研究

随着双酚A(BPA)因毒性被限制使用，其替代物双酚Z(BPZ)的生殖毒性亟待评估。温州医科大学团队通过体内外实验发现，BPZ通过上调METTL3介导的m6A甲基化，抑制睾丸间质细胞(LC)中SCARB1、STAR等关键基因表达，导致抗氧化基因(Gpx1、Cat)下调及睾酮合成障碍。该研究首次揭示BPZ通过METTL3-m6A-Camkk2通路损害雄性生殖功能，为评估新型塑料添加剂安全性提供重要依据。

　　

随着塑料制品广泛使用，双酚A(BPA)作为典型环境内分泌干扰物，已被证实会损害男性生殖健康。由于监管限制，工业界开始采用结构类似的双酚Z(BPZ)作为替代品，但学界对其生殖毒性认知仍存在巨大空白。睾丸间质细胞(LC)作为睾酮(T)合成的关键细胞，其功能异常可导致雄性不育、性腺发育障碍等严重后果。更值得关注的是，近年研究发现RNA甲基化(m6A)修饰能通过调控基因表达影响精子发生，而环境污染物可能通过表观遗传机制产生跨代效应。

温州医科大学的研究团队在《The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology》发表的研究，首次系统评估了BPZ对LC功能的影响。通过建立SD大鼠连续7天BPZ暴露模型(0-100 mg/kg/d)和原代LC体外实验(0-20 μM)，采用ELISA检测激素水平、qPCR/Western blot分析基因表达、m6A-MeRIP测序等技术，发现BPZ虽不改变LC数量，但显著降低血清睾酮水平。机制上，BPZ通过上调甲基转移酶METTL3，增加睾丸组织m6A修饰丰度，进而抑制胆固醇转运蛋白SCARB1、类固醇合成急性调节蛋白(STAR)以及关键酶CYP17A1、HSD17B3的表达。同时伴随抗氧化基因Gpx1、Cat下调，导致氧化应激加剧。体外实验进一步证实BPZ通过METTL3-m6A-Camkk2信号轴抑制LC功能。

【主要技术方法】

1. 建立SD大鼠BPZ梯度暴露模型(1-100 mg/kg/d×7天)
2. 原代LC分离培养及体外BPZ处理(24小时)
3. 血清LH/FSH/T检测(化学发光法)
4. m6A甲基化测序(MeRIP-qPCR)
5. 氧化应激指标检测(ROS/SOD活性)

【BPZ reduces serum T levels in vivo】
实验显示BPZ暴露组大鼠睾丸/附睾系数无变化，但100 mg/kg组血清T降低46.7%，伴随LC中Scarb1、Star等基因表达量下降50%以上。值得注意的是，m6A修饰关键基因Mettl3表达上调2.1倍，且睾丸组织m6A片段富集度增加38%。

【Discussion】
研究创新性揭示BPZ通过表观遗传机制损害LC功能：①首次证实BPZ通过METTL3-m6A通路调控Camkk2表达；②阐明BPZ与BPA的毒性差异——BPZ更显著影响胆固醇转运环节(SCARB1/STAR)；③发现m6A修饰与氧化应激的协同作用，BPZ处理使抗氧化酶GPX1活性降低62%。

该研究为评估塑料添加剂安全性提供新视角：一方面证实BPZ作为BPA替代品仍存在生殖风险，提示需重新审视其使用标准；另一方面揭示环境污染物通过m6A修饰影响生殖功能的新机制，为男性不育防治提供潜在靶点(METTL3抑制剂)。温州医科大学团队通过多维度证据链，为环境内分泌干扰物的风险评估建立了创新研究范式。