南瓜籽提取物靶向转移性黑色素瘤：超声辅助与加压乙醇提取技术的抗肿瘤机制研究

本研究针对转移性黑色素瘤的高侵袭性与治疗挑战，通过超声辅助提取（UAE）和加压乙醇提取（PEE）技术优化南瓜籽活性成分的提取工艺，发现其富含亚油酸甲酯（~47%）和油酸甲酯（~25%），显著抑制SK-MEL-28和A375细胞活力，通过破坏线粒体膜电位（MMP）和氧化还原平衡诱导肿瘤细胞死亡，为天然抗肿瘤药物开发提供新策略。

　　

研究背景与意义

黑色素瘤作为恶性程度最高的皮肤癌类型，全球发病率持续攀升，其转移性和耐药性导致临床治疗面临严峻挑战。传统化疗药物的高毒性促使科研人员转向天然产物的开发。南瓜籽（Cucurbita spp.）因其丰富的脂肪酸（如亚油酸、油酸）和生物活性成分（如类胡萝卜素、酚类化合物）被证实具有抗肿瘤潜力，但不同提取方法对其功效的影响尚未系统研究。

研究机构与方法

巴西高乔联邦理工大学（UFFS）和南里奥格兰德联邦理工学院（IFRS）的Saccomori Eduardo团队通过超声辅助提取（UAE，利用空化效应提升传质效率）和加压乙醇提取（PEE，通过调控温度/压力优化溶剂特性），从市售南瓜籽中获取提取物。采用气相色谱分析脂肪酸组成，并以SK-MEL-28和A375细胞为模型，通过MTT法（检测细胞活力）、吖啶橙染色（评估细胞死亡）、氧化还原指标（NOx、PSH、NPSH）和线粒体膜电位（MMP）测定，评价抗肿瘤效应。

研究结果

UAE与PEE工艺优化
UAE在50°C、100%功率和0.01 g·mL^?1
固液比下获得最高提取率（48.99%），显著优于PEE（30.28%）。两种方法的主要成分均为亚油酸甲酯（~47%）和油酸甲酯（~25%）。

抗肿瘤效应

• 细胞活力抑制：UAE提取物对黑色素瘤细胞的抑制作用更强，可能与更高浓度的活性成分有关。
• 氧化还原失衡：提取物处理组NOx水平升高，非蛋白巯基（NPSH）降低，提示氧化应激参与抗肿瘤机制。
• 线粒体功能障碍：MMP显著下降，表明线粒体途径凋亡被激活。

结论与意义

该研究证实南瓜籽提取物通过破坏氧化还原稳态和线粒体功能选择性杀伤黑色素瘤细胞，且UAE技术因其高效性和成分保留优势更具应用潜力。成果发表于《The Journal of Supercritical Fluids》，为天然抗肿瘤药物的开发提供了工艺优化依据和机制解析，同时推动农业副产物的高值化利用。