综述：超临界流体色谱在脂质分析与纯化中的十年进展

这篇综述系统总结了超临界流体色谱（SFC）在脂质组学领域的技术突破，重点探讨了以CO2 为流动相的SFC-MS在脂质类别分离（如FFA、TAG、PC等）、异构体分辨（如DAG/TAG位置异构体）及制备纯化（如ω-3 PUFA）中的优势，对比了HILIC/RPLC/GC等传统方法，为绿色高效脂质分析提供了方法论指导。

　　

超临界流体色谱的脂质分析革命

过去十年间，超临界流体色谱（SFC）凭借其独特的CO₂
基流动相体系，在脂质研究领域实现了从技术边缘到主流工具的跨越。这项技术通过调节压力、温度和极性修饰剂（如甲醇/乙腈），在10分钟内可完成传统液相色谱（LC）需30分钟的分析任务，同时减少90%有机溶剂消耗。

色谱柱的“选择性武器库”

核心突破在于新型固定相的开发：

• 非极性C18柱（如HSS C18 SB）通过疏水作用分离TAG/DAG，但对极性磷脂（如PC）分辨率不足；
• 混合极性柱（如Inertsil ODS-EP）嵌入极性基团，首次实现同时基于酰基链和极性头（如PE/PG）的双维度分离；
• BEH杂化颗粒（如Torus Diol）凭借二醇基团，在血浆样本中基线分离15类脂质，且长期稳定性优于传统硅胶柱。

值得注意的是，2-乙基吡啶修饰的BEH-2EP柱对ω-3/ω-6脂肪酸异构体（如α-C18:3/γ-C18:3）展现出特殊选择性，而手性柱（CHIRALPAK IG-U）更成功拆分了TAG sn-1,3位置异构体——这是GC和常规RPLC难以实现的。

从分析到制备的规模化跃迁

在制备领域，SFC已实现EPA/DHA的工业化纯化（纯度>90%）。德国KD Pharma等企业采用多柱串联SFC，单次处理量达公斤级，成本仅为正相色谱（NPLC）的1/14。近期，半制备SFC-ELSD与LC-MS联用方案，可在27分钟内完成22个脂质亚类的毫克级分馏，为功能脂质研究提供新范式。

未来挑战与多组学整合

尽管SFC在通量和环保性上优势显著，但固定相稳定性（如BEH柱的硅醚化）和复杂基质耐受性仍需优化。学者建议将SFC作为二维色谱（如SFC×RPLC）的第一维，结合高分辨质谱（HRMS）的MSⁿ
功能，以全面解析脂质分子网络。这种“绿色技术”在精准医学和功能性食品开发中，正展现出不可替代的价值。