多克隆抗γ-干扰素自身抗体特征解析与新型诊断策略：基于绝对定量生物标志物的前瞻性队列研究

针对抗γ-干扰素自身抗体（AIGA）综合征诊断标准缺失、死亡率高的临床难题，广州医科大学团队通过免疫组库测序与亲和层析技术，首次揭示AIGA以IgG3亚型为主导的克隆特征，开发出灵敏度94.2%、特异性95.2%的色谱检测法，为东南亚高发区提供低成本精准诊断方案。

　　

在免疫缺陷疾病领域，抗γ-干扰素自身抗体（AIGA）综合征正成为威胁东南亚人群健康的"隐形杀手"。这种疾病导致患者丧失清除胞内病原体的能力，41种病原体可乘虚而入，双重感染率高达46.7%。更棘手的是，现有ELISA检测法因无法反映AIGA多表位结合特性，导致假阴性频发，而基于中和活性的金标准检测又耗时昂贵。面对这一临床困局，广州医科大学附属第一医院团队在《Journal of Translational Autoimmunity》发表的研究，犹如为迷雾中的诊断带来一盏明灯。

研究团队采用多学科交叉策略，首先通过前瞻性队列（ChiCTR2000029306）纳入114例受试者（52例AIGA阳性、62例AIGA阴性、30例健康对照），运用10x Genomics单细胞VDJ测序解析B细胞受体特征，结合HiTrap Protein G HP柱与IFN-γ偶联亲和层析分离抗体，最后通过生物膜干涉技术（BLI）和THP-1细胞模型验证功能。

VDJ免疫组库揭示克隆异常
免疫组库分析显示AIGA(+)患者呈现IgG克隆优势（74%），D50多样性指数骤降至1.52（健康对照24.4），且IGHG组体细胞高频突变（SHM）显著增加。这提示患者体内存在异常活跃的B细胞克隆增殖。

IgG3亚型主导抗体库
血浆IgG水平突破16g/L警戒线（p<0.001），IgG亚型分析发现AIGA(+)组IgG3占比达65%，而AIGA(-)组以IgG1/IgG2为主。亲和层析纯化产物经SDS-PAGE验证纯度>95%，质谱确认50kDa/25kDa条带均为IgG组分。

强效中和能力机制阐释
BLI检测显示AIGA与IFN-γ结合亲和力KD达3.374×10^-10
M，竞争实验证明其可阻断45.7%的IFNGR1结合。THP-1细胞实验中，AIGA剂量依赖性抑制p-STAT1磷酸化和HLA-DR表达，完美复现患者血浆功能特征。

色谱法诊断性能突破
前瞻性队列验证显示，基于绝对定量的色谱法AUC达0.984（ELISA仅0.869），最佳截断值0.124mg/ml时灵敏度/特异性双超94%。值得注意的是，随着感染播散灶增加，色谱法检测值呈阶梯式上升（p<0.05），而ELISA结果则波动较大。

这项研究首次绘制了AIGA综合征的分子肖像：患者体内IgG3亚型抗体通过高频突变获得超强亲和力，形成"分子海绵"效应阻断IFN-γ信号通路。所建立的色谱检测法成本不足15美元/次，层析柱可重复使用10次，特别适合资源有限地区推广。论文通讯作者指出，该方法已在中国 Specialist Big Data Management Platform 建立标准化数据库，未来将通过AKTA系统实现自动化检测，为这一"东南亚特色"疾病提供精准诊疗新范式。