ZNT7缺陷通过AKT/TP53通路损害造血功能的机制研究及其在Ziegler-Huang综合征中的病理意义

本研究揭示了ZNT7缺陷导致骨髓衰竭的新机制：通过抑制AKT磷酸化上调TP53表达，进而损害造血细胞存活。研究人员利用患者来源的B-EBV淋巴细胞和Znt7KO小鼠模型，结合基因回补实验证实ZNT7通过调控AKT信号通路影响TP53稳定性，为遗传性骨髓衰竭综合征（BMF8）的治疗提供了新靶点。该成果发表于《Journal of Trace Elements in Medicine and Biology》，为锌转运体相关疾病的精准干预奠定理论基础。

　　

在生命科学领域，锌离子稳态调控一直是细胞功能研究的核心议题。锌转运体家族成员ZNT7（SLC30A7）作为高尔基体锌离子转运的关键蛋白，其缺陷与多种病理过程相关，但具体机制尚未阐明。法国安格斯大学医院和加州大学戴维斯分校的研究团队发现，携带ZNT7突变的Ziegler-Huang综合征患者表现出进行性全血细胞减少和骨髓衰竭，这为探索锌代谢与造血功能障碍的关联提供了独特案例。

研究人员首先通过患者来源的EBV转化B淋巴细胞（B-EBV）发现，ZNT7缺陷导致细胞生长显著减缓（第7天减少61.7%），伴随TP53蛋白水平异常升高和AKT磷酸化（Ser473）显著降低。胰岛素刺激实验进一步证实，突变细胞中AKT信号通路激活受损。为验证因果关系，团队通过慢病毒载体将野生型ZNT7（带Myc-DDK标签）回补至患者成纤维细胞，成功恢复了胰岛素诱导的AKT磷酸化能力，这为ZNT7-AKT-TP53轴的存在提供了直接证据。

关键技术包括：1）患者B-EBV淋巴细胞培养与生长曲线分析；2）Western blot检测AKT/TP53通路蛋白；3）免疫荧光共定位分析人/鼠骨髓造血标志物；4）Znt7KO小鼠血液学表型追踪（4-18周龄）；5）qPCR筛查24种锌转运体基因表达。

研究结果部分：
3.1 患者B-EBV淋巴细胞生长受损
通过连续7天监测细胞增殖，发现突变细胞生长速率较母源对照降低41%（第2天）至61.7%（第7天），提示ZNT7缺陷导致细胞存活障碍。

3.2 TP53表达升高与AKT激活减弱
Western blot显示突变细胞TP53蛋白水平增加2.3倍，而p-AKT（Ser473）降低67%。胰岛素刺激实验证实突变细胞丧失AKT响应能力，STAT3磷酸化同步下降，揭示信号通路级联损伤。

3.3 ZNT7过表达挽救AKT功能
在患者成纤维细胞中，外源ZNT7-Myc-DDK使基础p-AKT水平提升3.1倍，并恢复胰岛素敏感性。免疫荧光证实融合蛋白定位于高尔基体，表明ZNT7通过维持高尔基体锌稳态调控AKT活性。

3.5 人骨髓造血祖细胞的ZNT7共表达
免疫荧光显示ZNT7与CD34（造血祖细胞）、CD71（红系前体）、CD4（T细胞）、CD19（B细胞）完全共定位，但与MPO（髓系）仅部分重叠，说明ZNT7在多种造血谱系中发挥功能。

3.6 Znt7KO小鼠部分模拟人类表型
小鼠在18周龄出现贫血（红细胞减少21%），但血小板正常。骨髓免疫组化显示ZnT7主要表达于CD45⁺
有核造血细胞，与人类泛造血表达模式存在差异，解释了物种间表型差异。

讨论部分指出，ZNT7缺陷可能通过两种机制导致AKT抑制：1）高尔基体锌减少增强PP2A/PHLPP磷酸酶活性；2）PTEN降解受阻抑制PIP₃
信号。这促使TP53稳定化，触发造血细胞凋亡。研究首次将锌转运体缺陷与经典AKT-TP53通路关联，为BMF8的精准诊疗提供依据。

该研究的创新性在于：1）阐明ZNT7-AKT-TP53轴在造血维持中的作用；2）揭示锌稳态通过非经典途径调控关键信号通路；3）建立Ziegler-Huang综合征的首个动物模型。未来研究可探索锌剂联合AKT激动剂在遗传性骨髓衰竭中的治疗潜力，为罕见病治疗开辟新思路。