螺杆菌感染诱导小鼠自身免疫性肝炎模型的建立及其免疫机制研究

针对自身免疫性肝炎（AIH）缺乏理想动物模型的问题，研究人员通过螺杆菌（H. mastomyrinus, Hm）感染BALB/c小鼠，成功构建AIH-1样病理模型。研究发现Hm感染引发界面性肝炎、高丙种球蛋白血症及ANA/SMA自身抗体，并揭示IL17+ 细胞异常浸润的关键作用，为AIH发病机制研究提供新工具。

　　

自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis, AIH）是一种慢性进展性肝脏疾病，免疫系统错误攻击肝细胞导致炎症和纤维化。尽管全球发病率上升，但AIH的病因和机制仍不明确，尤其缺乏能模拟人类AIH-1慢性病程的动物模型。肠道微生物群与AIH的关联近年备受关注，但细菌病原体如何触发自身免疫反应尚不清楚。螺杆菌属（Helicobacter）中的肠肝致病种（EHHS）在肝病中的作用已有报道，但H. mastomyrinus（Hm）与AIH的关系仍是空白。

扬州大学的研究团队在《Journal of Translational Autoimmunity》发表研究，首次证实Hm感染可诱导小鼠出现AIH-1典型特征。研究人员通过腹腔注射Hm-17菌株感染雄性BALB/c小鼠，在4-22周内动态分析血清学指标、肝组织病理及免疫细胞分布。关键技术包括：1）血清ALT/AST检测和自身抗体（ANA/SMA）间接免疫荧光分析；2）肝组织H&E染色、天狼星红纤维化评分和油红O脂质染色；3）免疫组化检测CD3⁺
/CD19⁺
/F4/80⁺
细胞浸润；4）qPCR定量肝组织Hm载量及16S rRNA测序分析菌群组成。

3.1 Hm感染引发AIH样肝损伤
感染后4周出现局灶性坏死性肝炎，14-22周进展为界面性肝炎伴淋巴浆细胞浸润。血清ALT持续升高，IgG水平超正常值2-4倍，且80%小鼠产生ANA/SMA抗体，部分血清识别细胞质棒环结构（抗RR抗体），符合AIH-1诊断标准。

3.2 肝纤维化与脂肪变性
天狼星红染色显示8周后纤维化进展至F2-F3期，22周出现CD34⁺
肝窦毛细血管化。油红O染色证实晚期轻度脂肪变性，伴随肝组织TC/TG水平升高，模拟了AIH合并非酒精性脂肪肝（NAFLD）的临床特征。

3.3 肝脏免疫系统异常激活
免疫组化揭示F4/80⁺
库普弗细胞（KCs）和CD3⁺
T细胞在坏死灶周围富集，而CD19⁺
B细胞后期聚集于门脉区。尤为关键的是，IL17⁺
细胞在炎症灶中高度富集，而调节性T细胞（Foxp3⁺

3.4 肝脏菌群影响有限
尽管免疫组化显示Hm抗原广泛分布于肝窦和淋巴细胞，qPCR检测发现肝内Hm DNA载量始终较低（300-600拷贝/10⁵
细胞）。16S测序仅见螺杆菌科（Helicobacteraceae）丰度增加，排除其他菌群干扰。

讨论部分指出，该模型填补了AIH-1慢性进程动物模型的空白。Hm可能通过细胞致死膨胀毒素（CDT）和脲酶等毒力因子诱发肝细胞损伤，释放的IMP脱氢酶（IMPDH）棒环结构触发抗RR抗体产生。持续IL17⁺
细胞浸润表明Th17通路在打破肝脏免疫耐受中起核心作用，而KC吞噬功能受损可能导致细菌抗原持续暴露。与ConA或S100/CFA诱导的急性模型相比，该模型更贴近人类AIH的隐匿性进展特征。

该研究不仅为AIH发病机制研究提供新工具，还提示EHHS感染可能是人类AIH的环境诱因之一。未来需解析Hm毒力因子与宿主互作机制，并探索其他肠肝螺杆菌与AIH的关联性，为临床干预提供新靶点。