内皮细胞铁过载与铁死亡通过miR-32-5p/神经纤维蛋白2通路介导血栓形成和炎症的机制研究

本研究针对血栓闭塞性脉管炎（TAO）中内皮损伤机制不明的问题，揭示了铁过载和铁死亡（ferroptosis）通过miR-32-5p/NF2通路促进血栓形成和炎症的关键作用。研究人员通过临床样本分析、大鼠模型和细胞实验，发现TAO患者血管病变中存在铁代谢紊乱和脂质过氧化标志物（MDA、4HNE、ACSL4）升高，血清外泌体miR-32-5p通过抑制NF2-YAP信号加剧内皮损伤。铁螯合剂（DFO）和铁死亡抑制剂（Fer-1）可缓解疾病进展，为TAO治疗提供新靶点。

　　

血栓闭塞性脉管炎（Thromboangiitis obliterans, TAO）是一种以血管炎症、血栓形成和肢体缺血为特征的难治性疾病，患者20年截肢率高达46%。尽管吸烟被公认为主要诱因，但其分子机制仍不清楚。近年来，铁代谢异常和铁死亡（一种铁依赖的程序性细胞死亡形式）在心血管疾病中的作用备受关注，但它们在TAO中的角色尚未被探索。

为解决这一问题，复旦大学附属浦东医院的研究团队开展了一项跨学科研究。他们发现，TAO患者血管病变中存在显著的铁沉积和铁死亡标志物升高，包括转铁蛋白受体1（TFR1）和长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）。机制上，患者血清外泌体携带的miR-32-5p通过靶向抑制神经纤维蛋白2（NF2），阻断了Hippo-YAP信号通路，导致下游促铁死亡基因（TFR1、ACSL4）上调，最终引发内皮细胞铁死亡和血管损伤。动物实验中，铁螯合剂去铁胺（DFO）和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）显著改善了TAO模型大鼠的血管血流和炎症指标。该研究发表于《European Journal of Medical Research》，为TAO提供了首个铁死亡相关的治疗靶点。

研究采用多组学技术：临床样本队列分析（47例TAO患者vs 37例健康对照）、大鼠TAO模型（月桂酸钠诱导）、外泌体miRNA测序、双荧光素酶报告基因验证miR-32-5p与NF2的靶向关系，以及透射电镜观察线粒体形态学改变等。

主要结果

1. TAO患者存在铁代谢紊乱：患者血清铁（SI）和总铁结合力（TIBC）显著降低，血管病变中Perls染色显示铁沉积增加，伴随TFR1和铁蛋白表达升高。
2. 脂质过氧化标志物升高：病变血管中丙二醛（MDA）、4-羟基壬烯醛（4HNE）和ACSL4水平显著增加，提示铁死亡激活。
3. 外泌体miR-32-5p的致病作用：TAO患者血清外泌体miR-32-5p水平升高，通过靶向抑制NF2，减少YAP蛋白Ser¹⁰⁹
   /Ser²¹⁷
   位点磷酸化，进而上调TFR1和ACSL4。
4. 治疗干预效果：DFO和Fer-1处理可逆转内皮细胞铁死亡，大鼠模型中两者均能改善血流灌注、减少血栓形成和胶原沉积。

结论与意义
该研究首次阐明TAO中铁死亡的核心机制：循环外泌体miR-32-5p通过NF2-YAP通路驱动内皮细胞铁过载和脂质过氧化。这一发现不仅解释了TAO血管病变的分子基础，还为临床提供了潜在治疗策略——靶向铁死亡（如DFO）可能成为传统戒烟疗法的重要补充。未来研究可进一步探索miR-32-5p作为TAO诊断标志物的可能性，以及联合抗血栓治疗的协同效应。