靶向SRC克服BRAFV600E 结直肠癌对BRAF抑制剂的耐药性：机制与治疗新策略

本研究针对BRAFV600E 突变结直肠癌（CRC）患者对BRAF抑制剂（BRAFi）耐药这一临床难题，通过系统研究SRC激酶在耐药机制中的关键作用，发现SRC激活是BRAFi耐药的重要介质。研究人员采用基因编辑和药理学方法证实，联合SRC抑制剂（dasatinib）与BRAFi可协同抑制肿瘤生长，并通过JNK/c-Jun通路调控细胞凋亡。该研究为改善BRAFV600E CRC患者的治疗提供了新的联合治疗策略，具有重要临床转化价值。

　　

在结直肠癌治疗领域，BRAF^V600E
突变犹如一道难以逾越的屏障。这种发生在约10%患者中的基因变异，不仅预示着更差的预后，更让靶向治疗陷入困境——与黑色素瘤不同，BRAF抑制剂单药对结直肠癌几乎无效。即便联合EGFR抑制剂将患者生存期从5.9个月延长至9.3个月（BEACON临床试验），疗效仍远不尽如人意。这种"同突变不同命"的现象，背后隐藏着肿瘤细胞复杂的耐药机制。

为了破解这一难题，来自中国的研究团队将目光投向了SRC激酶——这个在多种癌症中扮演"信号传导枢纽"的非受体酪氨酸激酶。既往研究已发现SRC在结直肠癌进展中异常活跃，且与化疗耐药相关。但它在BRAF^V600E
结直肠癌靶向治疗耐药中的具体角色仍属未知。这项发表在《British Journal of Cancer》的研究，首次系统揭示了SRC介导BRAFi耐药的全新机制，并提出了创新的联合治疗方案。

研究人员运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建SRC敲除和过表达细胞系，结合高通量磷酸化激酶阵列分析信号通路变化。通过体外细胞功能实验（增殖、迁移、克隆形成）和体内CDX（细胞系来源异种移植）、PDX（患者来源异种移植）模型，评估药物组合效果。采用Chou-Talalay协同指数分析药物相互作用，并利用流式细胞术检测细胞周期和凋亡。研究使用的PDX模型来自医院手术切除的肿瘤标本，确保了临床相关性。

SRC调控BRAF^V600E
CRC的恶性表型
研究发现SRC过表达显著增强BRAF^V600E
CRC细胞（如HT29）的增殖、迁移和克隆形成能力，而SRC敲除则产生相反效果。在动物实验中，SRC过表达使肿瘤体积增大55天后加速生长，直观证实了SRC的促癌作用。

BRAF抑制触发SRC代偿性激活
磷酸化检测显示，BRAFi（vemurafenib/encorafenib）处理8小时后，pSRC水平显著升高。基因表达调控实验证实，SRC过表达使细胞对BRAFi的IC₅₀
值提高5倍，而SRC敲除使敏感性增加4倍，这种效应在BRAF野生型细胞中未出现。

SRC与BRAF双重抑制产生协同效应
联合使用FDA已批准的SRCi dasatinib与BRAFi，在所有测试细胞系中均显示强协同作用（CI<0.9）。这种组合使克隆形成减少70%，迁移能力下降60%，并通过增加G0/G1期细胞（约30%）和诱导凋亡（增加2-3倍）发挥抗肿瘤作用。

JNK/c-Jun通路参与适应性耐药
磷酸化蛋白质组学发现，双重抑制时c-Jun磷酸化增强。功能实验显示抑制JNK/c-Jun可增强联合治疗效果，而过表达c-Jun则削弱药物敏感性，提示该通路是潜在的耐药机制。

体内验证临床转化价值
在PDX模型中，encorafenib+dasatinib组合的抑瘤效果与标准方案（encorafenib+cetuximab）相当，且不受微卫星不稳定性（MSI）状态影响。Western blot证实联合治疗可同时抑制SRC和MAPK通路关键蛋白（pEGFR、pERK）。

这项研究不仅首次阐明SRC是BRAF^V600E
CRC靶向治疗耐药的关键介质，更开创性地提出将已上市药物dasatinib纳入联合治疗方案。其重要意义在于：从转化医学角度，直接利用现有药物组合可加速临床转化；从机制研究角度，发现JNK/c-Jun通路的调控作用为克服耐药提供新靶点；从临床实践角度，为EGFR抑制剂不耐受患者提供了替代方案。研究团队特别指出，这种策略对MSI和MSS（微卫星稳定）患者均有效，具有广泛适用性。未来值得探索三重靶向（BRAF+SRC+JNK）策略是否能进一步延长患者生存，以及SRC激活是否可作为预测生物标志物。这些发现为改善BRAF^V600E
这一高危亚型CRC的预后带来新希望。