STX4通过EMT/MMP2/CCND1信号通路调控卵巢癌细胞恶性行为的机制研究及治疗潜力

本研究针对卵巢癌(OC)高复发率与转移难题，首次揭示Syntaxin4(STX4)通过调控上皮-间质转化(EMT)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和细胞周期蛋白D1(CCND1)信号轴促进OC进展的分子机制。研究人员通过基因沉默技术证实STX4可显著抑制SK-OV-3和CAOV-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力，动物实验进一步验证其促瘤作用。该发现为OC靶向治疗提供了新策略，具有重要临床转化价值。

　　

卵巢癌作为女性生殖系统第三大恶性肿瘤，其五年生存率在过去20年未见显著提升。55-75%的患者在手术和标准化疗后仍面临复发困境，这主要归因于肿瘤细胞的侵袭转移特性和化疗耐药。面对这一临床难题，寻找新的治疗靶点成为突破方向。近期研究发现，Syntaxin4(STX4)作为SNARE家族成员，在多种肿瘤中异常表达并参与转移调控，但其在卵巢癌中的作用机制尚属空白。

江苏大学附属第三医院与上海浦东新区卫生健康委的研究团队在《Journal of Ovarian Research》发表的研究，首次系统阐明了STX4通过EMT/MMP2/CCND1信号网络驱动卵巢癌进展的分子机制。研究人员采用基因沉默技术构建STX4敲低的SK-OV-3和CAOV-3细胞模型，通过CCK-8、Transwell和划痕实验证实STX4缺失可显著抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力。Western blot分析显示STX4沉默导致上皮标志物E-cadherin上调、间质标志物vimentin下调，同时MMP2和CCND1表达显著降低。裸鼠移植瘤实验进一步验证STX4沉默可抑制肿瘤生长，免疫组化显示瘤组织中STX4与vimentin共下调而E-cadherin上调。

关键技术方法包括：1）qRT-PCR和Western blot验证基因沉默效率；2）CCK-8法检测细胞增殖；3）Transwell和划痕实验评估迁移侵袭能力；4）裸鼠异种移植模型验证体内效应；5）免疫组化分析临床样本标志物表达。

STX4 Silencing in OC cell lines inhibited the proliferation、migration and invasion of OC cells
通过shRNA干扰质粒成功将STX4 mRNA和蛋白水平分别降低70%和75%（P<0.01）。功能实验显示基因沉默组细胞增殖速率降低（CCK-8检测P<0.05），划痕愈合率下降，Transwell穿膜细胞数减少（图1-2），证实STX4对OC细胞恶性行为的调控作用。

STX4 gene silencing altered the biological behavior of OC cell lines in vitro
蛋白质组分析发现STX4沉默后E-cadherin表达升高而vimentin显著降低（P<0.05），提示EMT过程受抑。同时MMP2在两组细胞中均显著下调，MMP9仅在CAOV-3中降低，CCND1表达普遍下降（图3），揭示STX4通过多通路协同作用。

Effects of STX4 gene silencing on the proliferation of OC cells in vivo
裸鼠模型显示STX4沉默组肿瘤体积和重量显著减小（P<0.05），生长曲线从第20天开始明显下移。免疫组化证实瘤组织STX4表达降低伴随E-cadherin升高和vimentin降低（图4），与体外实验结果一致。

这项研究首次阐明STX4是调控卵巢癌进展的关键分子，其通过EMT/MMP2/CCND1信号网络促进肿瘤恶性行为。特别值得注意的是，STX4对不同亚型OC细胞（SK-OV-3和CAOV-3）的调控存在异质性，如MMP9仅在CAOV-3中受影响，这为个性化治疗提供了线索。尽管研究存在未进行基因过表达验证等局限，但其发现为克服卵巢癌转移和耐药提供了新靶点。鉴于STX4在浆液性卵巢癌中高表达的特性，未来可探索其作为预后标志物和联合治疗靶点的潜力，为改善患者生存带来新希望。