外泌体lnc-FAM72D-3通过MBNL1/FAK轴重塑肝癌细胞骨架促进乐伐替尼耐药

【编辑推荐】 针对晚期肝细胞癌（HCC）患者乐伐替尼耐药（LR）的临床难题，中山大学附属第三医院团队揭示了外泌体lnc-FAM72D-3通过调控MBNL1/FAK轴促进细胞骨架重塑的分子机制。研究发现，lnc-FAM72D-3通过增强E3泛素连接酶HECTD3对MBNL1的泛素化降解，激活FAK磷酸化，最终驱动HCC细胞增殖、侵袭和干性增强。该研究为克服LR提供了新靶点和联合治疗策略，发表于《Drug Resistance Updates》。

　　

肝癌是全球癌症相关死亡的第三大原因，晚期患者常因乐伐替尼耐药（LR）导致治疗失败。尽管靶向药物乐伐替尼已成为标准疗法，但肿瘤异质性使得其疗效受限。近年来，外泌体作为细胞间通讯的关键载体，其携带的长链非编码RNA（lncRNA）在耐药中的作用逐渐被关注。中山大学附属第三医院团队此前发现血清外泌体lnc-FAM72D-3在肝癌患者中显著高表达，但其功能机制尚不明确。

为揭示LR机制，研究人员构建了乐伐替尼耐药的HCC细胞系和类器官模型，结合体内外实验发现：外泌体lnc-FAM72D-3通过促进MBNL1的K48泛素化降解，削弱MBNL1与黏着斑激酶（FAK）的相互作用，导致FAK去核化并激活其磷酸化。活化的FAK重塑细胞骨架，增强HCC细胞的恶性表型。研究进一步证实FAK抑制剂可逆转耐药性，为临床联合治疗提供新思路。论文发表于《Drug Resistance Updates》。

关键技术包括：

1. 建立LR的HCC细胞系和类器官模型
2. 透射电镜（TEM）和粒径分析鉴定外泌体
3. 免疫共沉淀（Co-IP）和质谱（MS）分析蛋白互作
4. 免疫荧光-荧光原位杂交（IF-FISH）定位分子分布
5. 裸鼠移植瘤模型评估体内疗效

【研究结果】

1. Lnc-FAM72D-3在HCC组织中过表达并与LR相关
   通过分析Huh7和PLC/PRF/5细胞外泌体，证实lnc-FAM72D-3在LR患者血清和外泌体中显著上调，且高表达患者预后更差。

2. Lnc-FAM72D-3通过MBNL1/FAK轴促进LR
   机制研究表明，lnc-FAM72D-3作为支架分子增强HECTD3对MBNL1的泛素化降解，减少MBNL1与FAK的结合，导致FAK膜转位和Y397位点磷酸化激活。

3. FAK抑制剂逆转LR
   体内实验显示，FAK抑制剂PF-562271可显著抑制耐药肿瘤生长，联合乐伐替尼能协同延长小鼠生存期。

【结论与意义】
该研究首次阐明外泌体lnc-FAM72D-3通过HECTD3/MBNL1/FAK级联反应驱动LR的分子机制，提出FAK抑制剂联合乐伐替尼的临床转化潜力。研究不仅为LR提供了新型生物标志物，也为克服实体瘤耐药性提供了泛素化调控的新视角。