爬行动物隐孢子虫感染的分子特征与诊断挑战：人兽共患风险及防控策略

本研究针对爬行动物隐孢子虫（Cryptosporidium spp.）感染诊断困难及人兽共患风险问题，通过比较PCR、MZN染色和DFA三种检测技术的敏感性，分析了43份爬行动物粪便样本中隐孢子虫的流行率和分子特征。结果显示PCR检测灵敏度最高（94.4%），并鉴定出6种隐孢子虫，包括人兽共患物种C. muris、C. tyzzeri和C. ditrichi。该研究为爬行动物隐孢子虫感染的精准诊断和公共卫生防控提供了重要依据。

　　

论文解读
爬行动物作为新兴宠物在全球范围内流行，但其携带的隐孢子虫（Cryptosporidium spp.）可能引发严重的人兽共患病。这类寄生虫不仅导致爬行动物出现消化道症状（如蛇类的进食后反流、蜥蜴的体重下降），更令人担忧的是，部分虫种如C. muris和C. tyzzeri可直接感染人类。然而，传统诊断方法如改良抗酸染色（MZN）和直接免疫荧光抗体检测（DFA）存在灵敏度低、无法区分虫种的缺陷，导致临床误诊和公共卫生风险被低估。针对这一难题，来自西班牙和葡萄牙的研究团队在《Food and Waterborne Parasitology》发表研究，系统评估了不同检测技术的效能，并揭示了爬行动物隐孢子虫的分子流行病学特征。

研究团队采用三种关键技术：基于SSU rRNA基因的巢式PCR（用于虫种鉴定）、MZN染色（显微镜检测）和DFA检测（免疫荧光法），分析了来自14种爬行动物的43份粪便样本（34份来自西班牙动物庇护所，9份来自葡萄牙私人收藏）。通过序列分析和系统发育树构建，明确了隐孢子虫的遗传进化关系。

3. 结果
3.1 检测技术比较
PCR技术以94.4%的灵敏度显著优于MZN（61.1%）和DFA（33.3%），其中DFA甚至漏检了爬行动物特异性虫种C. serpentis和C. testudinis。值得注意的是，一例MZN阳性样本出现PCR假阴性，提示需结合多种检测手段。

3.2 虫种多样性
在18份阳性样本中鉴定出6个虫种：

• 蛇类：检出C. serpentis（与GenBank AF093499 100%匹配）及啮齿类相关虫种C. muris、C. tyzzeri，后者可能源自被食用的感染鼠类。
• 蜥蜴：首次在豹纹守宫（Eublepharis macularius）中发现C. ditrichi（99.51%匹配MN065795），推测与昆虫饲料污染有关。
• 陆龟：检出龟特异性虫种C. ducismarci和C. testudinis，其中一例C. testudinis样本存在罕见的杂合位点（Y=T/C）。

4. 讨论与结论
该研究首次在伊比利亚半岛的豹纹陆龟（Stigmochelys pardalis）中报道C. ducismarci感染，同时揭示了传统DFA试剂对爬行动物隐孢子虫的检测局限性。发现的人兽共患虫种（如C. muris）提示宠物贸易可能成为传播媒介，尤其需警惕通过啮齿类饲料造成的交叉感染。

研究团队建议将分子检测纳入爬行动物隐孢子虫的常规诊断流程，并强调“One Health”框架下加强饲主教育（如接触动物后洗手、饲料检疫）。未来需扩大样本量以明确环境因素（如室内/外饲养）对感染率的影响。这一成果不仅为爬行动物疾病防控提供技术标准，更为公共卫生部门制定人兽共患病监测策略提供了科学依据。