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人源谷胱甘肽S-转移酶mu 1介导硝化纤维素水解:反应机制与热分解行为的创新研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月09日 来源:International Biodeterioration & Biodegradation 4.1
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针对废弃硝化纤维素(NC)处理中的安全与环境问题,南京工业大学团队创新性利用人源谷胱甘肽S-转移酶mu 1(GSTM1)实现NC生物催化脱硝。研究证实GSTM1能将NC氮含量从12.97%降至8.4%,通过酯基转化、分子量调控及热稳定性改变,为军事废弃物处理提供绿色解决方案。
硝化纤维素(NC)作为火药主要成分,其废弃处理长期面临爆炸风险与环境污染的双重挑战。传统焚烧和填埋法不仅释放大量能量(硝酸酯键含能195.92 kJ·mol?1
),还会产生腐蚀性烟雾。尽管化学水解(如NaOH、NH2
NH2
·H2
O)能部分降解NC,但存在二次污染。微生物降解虽环保,但效率有限(氮含量仅降低0.9%)。南京工业大学团队另辟蹊径,首次将人源谷胱甘肽S-转移酶mu 1(GSTM1)应用于NC脱硝,相关成果发表于《International Biodeterioration》。
研究采用基因工程手段在E. coli BL21(DE3)中高效表达可溶性GSTM1,通过亲和层析纯化获得活性酶。结合元素分析、FTIR、GPC、SEM和TG-DSC等技术,系统评估了NC处理前后的理化性质变化,并采用Friedman模型分析热分解动力学。
材料与方法
研究选用军事来源NC(氮含量12.97%),通过pET28a(+)载体构建GSTM1重组菌株。酶反应条件优化采用单变量法,关键参数包括底物浓度(3.2 g·L?1
)、酶剂量(1.0 g·L?1
)和反应时间(8 h/37℃)。
表达与纯化
SDS-PAGE证实GSTM1以25-33 kDa可溶性形式表达(图1a),镍柱纯化后酶活达328.7 U·mg?1
,为后续实验提供高纯度制剂。
NC脱硝机制
FTIR显示1720 cm?1
处硝酸酯峰减弱,3400 cm?1
羟基峰增强,证实GSTM1将-ONO2
转化为-OH。GPC表明NC分子量从1.2×105
Da降至8.3×104
Da,分布指数由1.42增至1.87,提示酶解导致链断裂。
热稳定性改变
TG-DSC显示处理后的NC燃烧热降低,活化能(Ea
)从195.92降至168.47 kJ·mol?1
,Friedman模型证实分解反应能垒下降,危险性显著降低。
结论与意义
该研究开创了GSTM1介导NC生物脱硝的新范式:
这项技术不仅解决了军事废弃物处置难题,更拓展了人源酶在环境修复中的应用边界,兼具学术创新性与工程应用价值。
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