载有免疫检查点配体的前胰岛素原特异性调节性T细胞外泌体可抑制1型糖尿病自身免疫反应

针对1型糖尿病（T1D）中CD8+ T细胞介导的β细胞破坏问题，印度PGIMER团队创新性利用前胰岛素原（PPI）特异性Treg来源的外泌体（PPI-T-EXOL ）负载PD-1/TIGIT/BTLA配体，通过体外和STZ小鼠模型证实其可抑制Teff细胞增殖、降低β细胞凋亡并延缓糖尿病进展，为T1D提供了一种无HLA限制的细胞疗法替代方案。

　　

论文解读
在自身免疫性疾病领域，1型糖尿病（T1D）犹如一个顽固的"免疫叛乱"现场——患者体内的CD8⁺
T细胞错误地将分泌胰岛素的β细胞视为敌人展开攻击。尽管调节性T细胞（Treg）疗法曾带来希望，但存在细胞数量不足和表型可塑性等瓶颈。更棘手的是，传统免疫抑制剂如同"无差别轰炸"，可能引发全身免疫抑制。此时，印度昌迪加尔的PGIMER研究团队独辟蹊径，将目光投向了一种天然的信使——外泌体。这些直径仅30-150纳米的囊泡，既能携带免疫调节信号，又可规避细胞疗法的风险，成为新一代"精准免疫调节特快专递"。

研究团队首先锁定目标：通过流式细胞术分析40例新发T1D患者，发现其CD8⁺
T细胞高表达PD-1、TIGIT和BTLA三种免疫检查点分子（ICM）。这如同发现了叛乱细胞的"刹车踏板"——若能特异性激活这些抑制性受体，或可平息免疫风暴。团队创新性地将对应配体（ICL）装载到前胰岛素原（PPI）刺激的Treg外泌体（PPI-T-EXO^L
）中，构建出兼具抗原特异性和免疫调节功能的纳米武器。

关键技术方法
研究采用多学科技术组合：1）流式筛选T1D患者外周血CD8⁺
T细胞的ICM表达谱；2）从患者分离Treg经PPI刺激后，通过超速离心结合Western blot（检测标志蛋白CD63/TSG101）、透射电镜（形态观察）和zeta电位分析（稳定性评估）获得外泌体；3）体外评估PPI-T-EXO^L
对Teff细胞增殖（CFSE染色）和β细胞系1.1B4凋亡的影响；4）STZ诱导的C57BL/6糖尿病模型中验证治疗时效性。

研究结果
背景：T1D患者CD8⁺
T细胞的PD-1、TIGIT、BTLA表达显著升高，为靶向治疗提供依据。
方法：PPI-T-EXO^L
保持典型外泌体特征（粒径104.6±12.8 nm，zeta电位-14.2 mV），且高效负载ICL。
结果：

• 体外实验中，PPI-T-EXO^L
  使CD8⁺
  和CD4⁺
  Teff细胞增殖率分别降低62%和58%
• 联合PPI-Treg使用时，CD8⁺
  T细胞对1.1B4细胞的杀伤效率下降73%
• 动物模型显示，预防性给药使糖尿病发病延迟21天，胰岛淋巴细胞浸润减少80%

结论与意义
该研究开创性地将"生物导弹"（外泌体）与"精准制导"（ICL）结合，证实PPI-T-EXO^L
可通过三重机制发挥作用：1）直接结合Teff细胞ICM诱导耗竭表型；2）增强Treg免疫抑制功能；3）保护β细胞免于凋亡。这种疗法突破性地解决了传统治疗的三大痛点：无需HLA配型、避免全身免疫抑制、可规模化生产。正如通讯作者Devi Dayal强调的，这项发表于《International Immunopharmacology》的研究为T1D治疗提供了首个"即用型"细胞疗法替代方案，其技术路线还可拓展至其他自身免疫疾病领域。