地黄多糖通过TLR4/NF-κB信号通路调控LPS诱导的小鼠急性肝损伤抗炎机制研究

本研究针对炎症性肝损伤治疗需求，揭示了地黄多糖(RGP)通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号轴降低促炎因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达，提升抗氧化酶活性，显著改善LPS诱导的急性肝损伤。该发现为天然多糖类药物开发提供新靶点，发表于《Journal of Ethnopharmacology》。

　　

肝脏作为人体最大的解毒器官，近年来因药物、酒精等引发的急性肝损伤发病率持续攀升。传统治疗手段存在疗效局限和副作用等问题，而中药地黄(Rehmannia glutinosa)在肝病防治中已有两千余年应用历史。现代研究发现其活性成分地黄多糖(RGP)具有显著抗炎和抗氧化特性，但具体分子机制尚未阐明。

河南工业大学的研究团队通过建立LPS诱导的小鼠急性肝损伤模型和RAW264.7巨噬细胞炎症模型，结合分子对接、流式细胞术、Western blot等关键技术，系统探究了RGP的肝保护机制。研究发现RGP能显著降低血清ALT、AST水平，减少肝组织MDA含量，同时提升CAT等抗氧化酶活性。在分子层面，RGP通过直接结合Toll样受体4(TLR4)膜蛋白，抑制MyD88依赖的NF-κB信号通路活化，进而下调TNF-α、IL-1β等促炎因子表达，上调抗炎因子IL-10水平。

【材料与方法】
研究采用AB-8大孔树脂纯化获得两种RGP组分(RGP-1-A含19.02%糖醛酸和11.83%硫酸基；RGP-2-A含1.1%糖醛酸和8.56%硫酸基)。通过LPS(5 mg/kg)腹腔注射建立小鼠模型，预给药RGP(50-200 mg/kg)14天。细胞实验采用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞，检测NO、ROS水平及iNOS表达。关键技术包括：分子动力学模拟分析RGP-TLR4结合特性，ELISA检测血清炎症因子，RT-qPCR分析基因表达，Western blot验证蛋白磷酸化水平。

【结果】

1. 细胞实验显示RGP可剂量依赖性降低RAW264.7细胞内ROS和NO水平，抑制iNOS mRNA表达达40-60%。
2. 动物实验证实RGP处理组小鼠肝组织MDA含量降低35-50%，CAT活性提升2-3倍。
3. 分子机制研究表明RGP-1-A与TLR4/MD2复合物结合能达-8.9 kcal/mol，显著抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号轴活化，使TNF-α蛋白表达降低55%。
4. 病理学分析显示RGP治疗组肝细胞坏死面积减少70%，炎性浸润显著改善。

【结论与意义】
该研究首次阐明RGP通过靶向调控TLR4/NF-κB信号通路发挥肝保护作用的分子机制，为开发基于天然多糖的肝病治疗策略提供理论依据。研究发现两种RGP组分中，高糖醛酸含量的RGP-1-A表现出更强的抗炎活性，这为后续结构优化指明方向。论文发表于民族药理学顶级期刊《Journal of Ethnopharmacology》，不仅验证了传统中药的科学价值，更为临床转化提供重要实验依据。值得注意的是，研究采用的分子对接与动物实验相互验证的策略，为天然产物机制研究树立了方法学典范。