大麻叶提取物（萨空那空栽培种）抗胆管癌活性研究及其机制分析

本研究针对泰国东北部高发的胆管癌（CCA）这一重大公共卫生问题，探索了萨空那空地区"松鼠尾"大麻（CLE）提取物的抗癌潜力。研究人员通过测定总酚/黄酮含量（Folin-Ciocalteu/AlCl3 法）、抗氧化活性（DPPH/ABTS）及高效液相色谱（HPLC）分析，发现CLE中富含大麻酚（CBN 89.57±10.34 μg/mg），对KKU-213B细胞具有显著生长抑制作用（IC50 18.02±9.43 μg/ml/72h），并通过上调p53、caspase-3和Bax促凋亡蛋白表达发挥作用，为开发本土植物抗癌疗法提供了科学依据。

　　

在泰国东北部的萨空那空、那空拍侬等省份，肝吸虫（Opisthorchis viverrini）感染导致的胆管癌（CCA）发病率居全球之首，每年夺走超过1万人的生命。这种恶性肿瘤患者确诊时多属晚期，五年生存率不足20%，传统治疗手段收效甚微。与此同时，当地世代栽培的"松鼠尾"大麻（Cannabis sativa）在传统医学中早有应用记载，其叶片被用于治疗哮喘、食欲不振，花朵则用于神经系统疾病。现代研究已发现大麻中的大麻二酚（CBD）、Δ9-四氢大麻酚（THC）等成分具有抗肿瘤潜力，但针对CCA的特异性研究尚属空白。

为探索本土药用植物的抗癌价值，泰国孔敬大学医学院胆管癌研究所与拉贾曼加拉理工大学的研究团队合作，在《Journal of Herbal Medicine》发表了关于萨空那空栽培种大麻叶提取物（CLE）抗CCA活性的系统研究。研究采用乙醇/水两种溶剂提取，通过HPLC鉴定活性成分，结合SRB法检测细胞增殖抑制，并深入探究了凋亡相关蛋白表达机制。

关键技术包括：1）采用Folin-Ciocalteu法和AlCl₃
比色法分别定量总酚/黄酮含量；2）DPPH/ABTS自由基清除实验评估抗氧化活性；3）HPLC定量主要活性成分；4）SRB法测定KKU-213B细胞生长抑制率；5）Western blot分析p53、Bcl-2等凋亡标志蛋白。

【总酚与总黄酮含量】
乙醇提取物（CLE-ethanol）展现出更高生物活性，总酚含量达4.70±0.43 mg GAE/g，显著高于水提物（1.174±0.32 mg GAE/g）。黄酮含量同样呈现溶剂依赖性，乙醇提取物含63.65±1.60 mg QE/g，是水提物的2.8倍。

【抗氧化活性】
DPPH/ABTS实验显示CLE-ethanol的抗氧化能力与其酚类物质含量呈正相关，清除自由基的EC₅₀
值分别为78.14±1.64 μg/mL和62.25±5.56 μg/mL，证实其具有显著的氧化应激调节潜力。

【活性成分分析】
HPLC鉴定出CLE中关键成分大麻酚（CBN）含量达89.57±10.34 μg/mg，该物质在后续实验中显示出剂量依赖性的抗癌活性。

【细胞生长抑制】
SRB实验证明CLE对KKU-213B细胞的抑制作用具有时间依赖性，72小时IC₅₀
值（18.02±9.43 μg/mL）较24小时（55.26±1.64 μg/mL）显著降低。纯CBN的抑制效果更为突出，72小时IC₅₀
仅4.00±0.96 μM。

【凋亡机制】
Western blot揭示CLE通过双重途径诱导凋亡：一方面上调肿瘤抑制蛋白p53和促凋亡蛋白Bax，另一方面下调抗凋亡蛋白Bcl-2，同时激活caspase-3凋亡执行蛋白，形成完整的凋亡信号通路。

该研究首次系统证实萨空那空栽培种大麻叶提取物通过多靶点作用抑制CCA，其乙醇提取物富含的酚类、黄酮类化合物及CBN协同发挥抗氧化和促凋亡作用。特别值得注意的是，CLE调控的p53-Bcl-2/caspase通路为开发针对CCA的植物疗法提供了明确靶点。尽管需要进一步临床验证，这项研究为泰国东北部特色药用植物的现代化开发树立了典范，也为高发区癌症患者提供了潜在的低成本辅助治疗方案。研究团队特别强调，将传统草药知识与现代肿瘤生物学相结合，是开发区域性特色抗癌药物的有效策略。