骨髓间充质干细胞联合miR181-a协同治疗多发性硬化的免疫调控机制与临床潜力

针对多发性硬化（MS）现有疗法副作用大且疗效不稳定的问题，哈尔滨医科大学团队创新性提出骨髓间充质干细胞（BMSCs）过表达miR181-a的协同治疗方案。研究发现miR181a-BMSCs通过上调调节性B细胞（Bregs）和T细胞（Tregs）、抑制Th17细胞分化，显著缓解实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型症状，为自身免疫疾病治疗提供新策略。

　　

多发性硬化（Multiple Sclerosis, MS）是一种以中枢神经系统（CNS）炎症性脱髓鞘为特征的自身免疫疾病，全球发病率持续上升且缺乏根治手段。现有治疗方案常伴随免疫功能障碍等严重副作用，而传统骨髓间充质干细胞（BMSCs）疗法虽具免疫调节潜力，却面临体内作用不稳定的瓶颈。更棘手的是，具有免疫平衡调控作用的miR181-a因分子结构不稳定易在循环系统中降解。这一领域亟待开发既能靶向递送又可持续发挥疗效的新型治疗策略。

哈尔滨医科大学的研究团队在《Stem Cell Research》发表突破性研究，首次将BMSCs的靶向递送优势与miR181-a的免疫调节功能相结合。通过慢病毒包装系统构建miR181-a过表达的BMSCs（miR181a-BMSCs），利用EAE小鼠模型揭示该联合疗法可通过外泌体递送miRNA、重塑免疫细胞平衡，为MS治疗提供全新思路。

研究采用慢病毒转染构建稳定细胞株、流式细胞术分析免疫细胞亚群、ELISA检测细胞因子、组织病理学评估脊髓损伤等关键技术。实验选用C57BL/6雌鼠建立EAE模型，通过尾静脉注射给药，所有操作均符合哈尔滨医科大学伦理委员会规范（批准号：HMUIRB20180010）。

主要研究结果

miR181a-BMSCs的构建与表征
通过慢病毒系统成功使BMSCs的miR181-a表达提升100倍（图1H），且外泌体中miRNA浓度增加10倍（图1I）。细胞表面标志物CD29/CD44/Ly6A/E保持>95%阳性（图2B），并保留成软骨/成骨/成脂分化能力（图2C-E），证实基因修饰未影响干细胞特性。

体外免疫调节效应
与普通BMSCs相比，miR181a-BMSCs与淋巴细胞共培养时：

• Bregs（CD5⁺
  CD1d⁺
  CD19⁺
  IL10⁺
  ）比例提升2.1倍（图3A）
• Tregs（CD4⁺
  CD25⁺
  Foxp3⁺
  ）增加1.8倍（图3B）
• Th17细胞（CD4⁺
  IL17⁺
  ）减少63%（图3C）
  ELISA显示IL-10分泌显著增强，而促炎因子IFN-γ/IL-17显著抑制（图3D-I），证实协同调控作用。

体内治疗效果
在EAE模型中：

• 延迟发病时间4.2天（图4E）
• 峰值临床评分降低58%（图4F）
• 脊髓炎性浸润面积减少72%（图6C）
• 脱髓鞘区域缩小65%（图6D）
  机制上通过促进Bregs分泌IL-10（图5H），间接调控Tregs/Th17平衡（图5B-C），形成"IL-10+Bregs→Tregs↑/Th17↓"的级联反应（图7）。

结论与展望
该研究开创性地将干细胞疗法与miRNA调控相结合，突破单一疗法局限：

1. 利用BMSCs作为"生物载体"解决miR181-a递送难题
2. 通过外泌体途径延长miRNA半衰期
3. 双通路调控B细胞/T细胞免疫平衡
   不仅为MS治疗提供新方案，更为其他自身免疫疾病（如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮）的协同治疗策略设计提供范式。未来需进一步评估长期安全性，但现有数据已显示该方案具有显著的临床转化潜力。