基于脂质体展示的登革热E蛋白二聚体多价疫苗：突破免疫干扰实现四价中和抗体的创新策略

本研究针对登革热疫苗开发中存在的免疫干扰和血清型不平衡难题，通过计算生物学设计的稳定化E蛋白二聚体（SC）结合钴卟啉磷脂（CoPoP）脂质体展示技术，成功开发出可同时诱导四型特异性中和抗体的新型亚单位疫苗。该疫苗在小鼠模型中证实了其无免疫干扰特性，为安全有效的登革热疫苗研发提供了新范式。

　　

登革热病毒（DENV）感染每年威胁全球半数人口，其四个血清型（DENV1-4）引发的交叉免疫反应可能导致抗体依赖增强作用（ADE），使传统疫苗研发陷入困境。现有减毒活疫苗（LAV）如Dengvaxia因血清型复制不平衡，反而增加未免疫人群的重症风险。这一"疫苗悖论"亟需突破——理想的登革热疫苗必须同时平衡四型免疫反应，且规避ADE风险。

美国北卡罗来纳大学团队在《npj Vaccines》发表的研究给出了创新解决方案。研究人员采用计算设计的稳定化E蛋白二聚体（SC）作为抗原，通过钴卟啉磷脂（CoPoP）脂质体（CPQ）多价展示技术，构建了新型四价亚单位疫苗。关键技术包括：1）基于结构生物学的E蛋白二聚体稳定化突变设计；2）CPQ脂质体抗原展示系统构建；3）小鼠免疫模型评估；4）成熟病毒（Vero Furin细胞培养）中和实验；5）抗体特异性耗竭实验。

稳定化DENV1-4 E二聚体的设计
通过aB界面（I2/I9）、I-II域铰链区（S1/U6）和I域核心（P4）的定点突变，使E蛋白在生理浓度（50 nM）下保持二聚体状态。质谱光散射证实SC变体较野生型（WT）表达量提升10倍，且37℃下稳定存在，而WT蛋白则呈单体状态。

脂质体-抗原复合物特性
CPQ脂质体含CoPoP、PHAD-3D6A（MPL类似物）和QS-21佐剂，以1:4（E单体:CoPoP）质量比实现每个脂质体展示5-6个E二聚体。动态光散射显示复合物粒径保持103±2 nm，ELISA证实脂质体结合不破坏B7/C10等中和抗体表位。

小鼠免疫应答特征
双价（DENV2+3）和四价（DENV1-4）制剂均诱导血清型特异性（TS）中和抗体，FRNT₅₀
滴度达10³
-10⁴
。关键发现包括：1）SC变体免疫原性显著优于WT（p<0.05）；2）CPQ展示使DENV2中和滴度提升3倍；3）四价制剂中各血清型应答均衡，无免疫干扰；4）抗体耗竭实验证实90%中和活性来自TS抗体。

讨论与意义
该研究首次实现四价DENV疫苗的"免疫平衡"：1）结构指导的E蛋白工程解决了天然抗原不稳定性；2）脂质体多价展示增强B细胞活化；3）规避了LAV疫苗的复制不平衡风险。相较于既往亚单位疫苗V180（III期出现DENV4免疫衰减），CPQ-sE SC在抗原设计和递送系统上实现双重突破。未来需在非人灵长类验证其持久保护力，但该平台已为黄病毒疫苗研发提供新思路——包括寨卡病毒等同样面临ADE挑战的病原体。

研究局限性在于小鼠模型无法模拟人类DENV感染过程，且长期免疫记忆有待考察。但该工作标志着亚单位疫苗设计的范式转变：通过整合计算生物学、结构疫苗学和新型递送技术，为复杂病原体的多价疫苗开发树立了新标杆。