巴拿马结核分枝杆菌复合体利福平和异烟肼耐药相关突变谱分析（2015-2021）：分子流行病学与临床意义

这篇研究通过回顾性分析2015-2021年巴拿马4,301株结核分枝杆菌复合体（MTBC）的GenoType MTBDRplus检测数据，揭示了利福平（RIF）和异烟肼（INH）耐药的关键突变谱。研究发现8.8%菌株携带耐药相关突变，以rpoβ基因H526D（30.2%）、katG S315T1（6.4%）和inhA C-15T（11.1%）为主，首次系统描绘了该国耐药结核病（MDR-TB/RR-TB）的分子特征，为优化诊断和精准治疗提供科学依据。

　　

ABSTRACT
结核病（TB）作为全球高发病率与死亡率的传染病，其防控面临耐药性挑战。巴拿马2015年起采用GenoType MTBDRplus^?
2.0快速分子检测技术，本研究首次系统分析2015-2021年间4,301株结核分枝杆菌复合体（MTBC）的耐药突变谱，揭示8.8%（377株）携带耐药相关突变，其中rpoβ基因突变占比56.0%（H526D和S531L为主），inhA和katG基因突变分别占11.9%和8.2%。研究还发现9.5%菌株存在rpoβ/inhA双突变，13.5%为rpoβ/katG共突变，38种耐药模式中H526D、S315T1和C-15T为高频位点。

INTRODUCTION
COVID-19大流行导致2022年耐多药结核（MDR-TB）和利福平耐药结核（RR-TB）发病率上升3.1%。巴拿马2021年结核发病率达42/10万，其中4.2%新病例和12%复治病例为RR-TB/MDR-TB。传统药敏试验耗时较长，而分子检测可快速识别rpoβ（RIF耐药）、katG和inhA（INH耐药）基因突变。本研究填补了巴拿马耐药突变分子流行病学数据的空白。

MATERIALS AND METHODS
回顾性分析Gorgas纪念研究所2015-2021年GenoType MTBDRplus检测结果。采用Genolyse试剂盒提取DNA，通过PCR扩增和反向杂交检测突变。数据分析使用卡方检验、Pearson相关性和主成分分析（PCA），显著性阈值设为P≤0.05。

RESULTS

1. 突变分布特征：rpoβ基因突变率显著高于其他基因（56.0% vs. inhA 11.9%），且呈逐年下降趋势（RIF耐药年降幅0.44%，P=0.03）。
2. 高频突变位点：
   • rpoβ：H526D（30.2%）、S531L（8.8%）
   • katG：S315T1（6.4%）
   • inhA：C-15T（11.1%）
3. 多药耐药模式：rpoβ S531L+katG S315T1组合占MDR菌株的11.7%，PCA显示该组合与MDR表型强相关（贡献率50.1%）。
4. 技术局限性：13株菌株在rpoβ 526-529密码子区域出现野生型条带缺失但未检出突变探针，提示可能存在未覆盖的新突变。

DISCUSSION

1. 地理特异性：巴拿马rpoβ H526D突变优势（30.2%）不同于哥伦比亚（S531L为主，36.6%），可能与本地克隆株传播有关。
2. 临床意义：
   • inhA C-15T突变提示低浓度INH耐药，需调整治疗方案；
   • katG S315T1突变与高浓度INH耐药和MDR强相关；
   • rpoβ S531L突变菌株可能具有适应性代价。
3. 防控建议：需整合全基因组测序（WGS）以识别罕见突变，并加强患者临床数据与分子特征的关联分析。

ACKNOWLEDGMENTS
感谢秘鲁Oscar Romero医疗中心的Alberto Mendoza Ticona博士对文稿的审阅，以及巴拿马国家结核病实验室网络的协作支持。

（注：全文严格基于原文数据，未添加非文献支持内容；专业术语如GenoType MTBDRplus^?
、MDR-TB等保留原格式；统计符号如P<0.05、R²
=0.8515等按原文呈现）