通过抑制Aurora激酶B克服MET扩增型肺癌的MET靶向药物耐药性

推荐：本研究针对MET扩增型非小细胞肺癌（NSCLC）患者面临的MET酪氨酸激酶抑制剂（MET-TKI）获得性耐药难题，通过建立耐药细胞模型（H1993 PR-S2）和高通量药物筛选，发现Aurora激酶B（AURKB）抑制剂可显著抑制耐药细胞活性。研究揭示AURKB通过激活STAT3-BCL2轴和降解促凋亡蛋白BIMEL 促进耐药，而AURKB抑制剂能诱导G2/M期阻滞和凋亡，并在小鼠异种移植模型和患者样本中验证其疗效。该研究为克服MET-TKI耐药提供了新靶点，具有重要临床转化价值。

　　

MET扩增是非小细胞肺癌（NSCLC）的重要驱动因素，MET靶向药物如卡马替尼（capmatinib）和特泊替尼（tepotinib）虽能显著改善患者预后，但获得性耐药仍是临床重大挑战。据统计，约35%患者因MET激酶域二次突变（如D1228N/Y1230C）耐药，45%因KRAS/EGFR等旁路激活耐药，剩余20%机制未明。这种耐药性导致患者生存期急剧缩短，亟需揭示新型耐药机制并开发应对策略。

为攻克这一难题，来自国家癌症中心的研究团队在《Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research》发表研究，通过建立MET-TKI耐药细胞系H1993 PR-S2，结合高通量化合物筛选、RNA测序和体内外功能实验，首次揭示AURKB-STAT3-BCL2轴是MET-TKI耐药的关键机制，并证实AURKB抑制剂巴瑞塞替（barasertib）可有效逆转耐药。

研究主要采用以下技术：1）通过逐步递增MET-TKI（PHA665752）浓度构建耐药细胞模型；2）基于276种抗癌化合物的高通量筛选鉴定敏感药物；3）RNA测序与基因集富集分析（GSEA）解析差异通路；4）免疫印迹和qPCR验证蛋白/mRNA表达；5）流式细胞术检测细胞周期与凋亡；6）N2G小鼠异种移植模型评估药效；7）TCGA数据库和患者活检样本进行临床相关性分析。

3.1. AURKB在耐药细胞中的激活
研究团队从MET扩增型H1993细胞中培育出对PHA665752完全耐药的H1993 PR-S2细胞，发现其MET磷酸化（p-MET）显著降低，而AURKB及其磷酸化形式（p-AURKB）蛋白水平升高。高通量筛选显示，AURKB选择性抑制剂巴瑞塞替对耐药细胞的半数抑制浓度（IC₅₀
）比亲本细胞低10倍，且敲低AURKB可恢复耐药细胞对MET-TKI的敏感性。

3.2. AURKB通过STAT3-BCL2轴促存活
GSEA分析显示STAT3靶基因在耐药细胞中富集。机制上，AURKB过表达直接增加STAT3磷酸化（p-STAT3 T705），并上调抗凋亡蛋白BCL2的表达；而巴瑞塞替处理可剂量依赖性降低BCL2水平，同时激活凋亡标志物cleaved-caspase3。值得注意的是，STAT3或BCL2单独敲低并不能逆转耐药，提示AURKB可能通过多通路协同维持耐药表型。

3.3. AURKB抑制诱导凋亡
耐药细胞中促凋亡蛋白BIM_EL
表达显著降低，而巴瑞塞替通过减少AURKB介导的BIM S87位点磷酸化，阻止其泛素化降解，从而积累BIM_EL
。流式检测显示，巴瑞塞替在100 nM浓度即可诱导耐药细胞G2/M期阻滞和早期凋亡（Annexin-V⁺
细胞增加3倍）。

3.4. 体内实验验证疗效
在N2G小鼠模型中，巴瑞塞替单药使H1993 PR-S2移植瘤体积缩小50%（p<0.01），Ki-67阳性细胞减少70%，且未引起明显毒性。

3.5. 临床样本验证
一例MET扩增NSCLC患者耐药后活检显示，相比治疗前样本，AURKB和p-STAT3表达分别升高4.2倍和3.8倍（p<0.001）。TCGA数据分析进一步证实，AURKB高表达与肺腺癌患者不良预后显著相关（HR=1.52, p=0.0083）。

讨论与意义
该研究首次阐明AURKB通过双重机制驱动MET-TKI耐药：一方面激活STAT3-BCL2促进存活，另一方面磷酸化BIM导致其降解。不同于传统观点，这种耐药独立于MET信号本身或EMT过程。临床前数据支持AURKB抑制剂（如已进入II期临床试验的AZD2811）作为潜在挽救方案。局限性在于耐药细胞中AURKB上调的具体诱因仍需探索，且需扩大患者队列验证生物标志物。该研究为克服肺癌靶向耐药提供了新视角，未来可探索AURKB抑制剂与MET-TKI联用策略。