揭示Hsp40家族成员Cysteine String Protein-α（CSPα）在小鼠血小板分泌调控及血栓形成中的关键作用

血小板通过释放颗粒内容物调控血管微环境，但其分泌机制中的关键分子调控网络尚未完全阐明。本研究聚焦Hsp40家族成员Cysteine String Protein-α（CSPα），通过构建CSPα-/- 小鼠模型，首次证实CSPα缺失会显著抑制α/致密颗粒分泌、削弱血栓形成能力，并揭示其通过调控GPVI受体和αIIb β3 激活影响血小板功能。该研究为血栓性疾病治疗提供了新靶点，发表于《Blood Advances》。

　　

血小板作为血液中的"急救员"，通过释放α颗粒、致密颗粒和溶酶体内容物参与止血和血栓形成。这一精密调控过程依赖于SNARE（可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体）复合体等分子机器，但其中关键调控元件仍存在认知空白。尤其令人困惑的是，为何某些遗传性血小板功能障碍患者会出现选择性颗粒分泌缺陷？这提示我们可能遗漏了某些关键调控因子。

针对这一科学问题，国外研究团队在《Blood Advances》发表的研究首次系统解析了分子伴侣Cysteine String Protein-α（CSPα，又称DNAJC5或CLN4）在血小板中的独特作用。通过构建CSPα基因敲除小鼠模型，研究者发现这一Hsp40家族成员竟是血小板分泌调控的"总开关"，其缺失会导致选择性颗粒分泌障碍、出血倾向和血栓形成缺陷，甚至影响骨髓造血功能。

研究采用多学科技术手段：通过流式细胞术分析CSPα^-/-
小鼠血小板表面标志物；采用微流控芯片模拟血管损伤评估血栓形成能力；利用亚细胞分级和免疫荧光定位CSPα的分布；结合骨髓组织学分析造血微环境改变。所有实验均使用年龄匹配的野生型小鼠作为对照。

CSPα缺失导致选择性分泌缺陷
通过比较野生型和CSPα^-/-
血小板对不同激动剂的反应，研究发现CSPα缺失显著抑制ADP诱导的致密颗粒释放和凝血酶诱导的α颗粒分泌，但对溶酶体释放影响较小。这一选择性缺陷提示CSPα可能特异性调控某些SNARE复合体的组装。

血栓形成功能障碍的机制
在FeCl₃
诱导的颈动脉血栓模型中，CSPα^-/-
小鼠表现出显著延长的血栓形成时间。进一步分析发现，CSPα缺失导致血小板表面GPVI（糖蛋白VI）受体表达降低，并削弱胶原诱导的α_IIb
β₃
整合素激活，这解释了为何这类血小板对胶原特别不敏感。

独特的亚细胞定位特征
亚细胞分级显示CSPα主要定位于膜结构但非脂筏区，免疫荧光证实其与α颗粒标记物P-selectin共定位。有趣的是，虽然CSPα被报道是棕榈酰化蛋白，但研究发现其膜定位不依赖经典脂筏微域。

骨髓造血微环境改变
CSPα^-/-
小鼠表现出全血细胞减少，包括红细胞、白细胞和巨核细胞。骨髓活检显示胶原I沉积增加但无纤维化，提示CSPα可能通过调控造血干细胞龛影响血细胞生成。

这项研究确立了CSPα作为血小板分泌调控网络的核心元件：它既是SNARE复合体的分子伴侣，又通过调控GPVI受体影响血小板活化。临床意义在于：为解释某些未确诊的血小板功能障碍提供了新视角；揭示CSPα可能成为抗血栓治疗的新靶点；其骨髓表型提示DNAJC5基因突变可能与某些造血系统疾病相关。未来研究可探索CSPα在人类血小板疾病中的突变频率及其与出血倾向的关联。