Activin A通过ALK4-Smad2/3通路加剧新生儿坏死性小肠结肠炎的机制研究及治疗新靶点探索

本研究聚焦新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）的发病机制，揭示了Activin A通过激活ALK4-Smad2/3信号轴，加剧肠上皮细胞凋亡和屏障破坏的关键作用。研究人员通过体内外模型证实，外源性Activin A加重NEC病理损伤，而中和抗体干预可逆转这一效应，为NEC治疗提供了新的分子靶点。

　　

新生儿坏死性小肠结肠炎（Necrotizing enterocolitis, NEC）是早产儿最致命的胃肠道疾病之一，其高死亡率与肠道屏障破坏、细菌易位及失控的炎症反应密切相关。尽管已知TLR4信号和微生物失调参与NEC发生，但调控肠上皮凋亡和屏障完整性的关键分子机制尚未阐明。Activin A作为TGF-β超家族成员，在炎症性疾病中表现出双重调控作用，但其在NEC中的病理贡献仍是空白。

重庆医科大学的研究团队通过建立新生小鼠NEC模型（缺氧、低温、LPS和配方奶喂养）和LPS刺激的IEC-6肠上皮细胞模型，首次系统评估了Activin A的致病机制。研究发现：1）NEC小鼠肠道中Activin A表达显著上调；2）外源重组Activin A（rActivin A）加重体重下降、死亡率及组织损伤，伴随紧密连接蛋白（ZO-1/Occludin/Claudin-1）减少和炎症因子（IL-1β/IL-6）升高；3）中和抗体干预可逆转上述损伤；4）机制上，Activin A通过ALK4受体激活Smad2/3磷酸化（非NF-κB/ERK/AKT通路），驱动上皮细胞凋亡（Bax/Cleaved caspase-9↑）。该研究发表于《International Immunopharmacology》，为NEC治疗提供了精准干预靶点。

关键技术包括：1）新生小鼠NEC模型构建；2）IEC-6细胞炎症损伤模型；3）重组蛋白/抗体干预；4）屏障功能评估（免疫荧光/WB检测紧密连接蛋白）；5）多维度凋亡检测（TUNEL/流式/WB）；6）信号通路分析（磷酸化Smad2/3检测）。

【研究结果】

1. Activin A在NEC模型小鼠肠道组织中表达上调
   ELISA和WB显示NEC组Activin A蛋白水平显著高于对照组，免疫组化证实其定位在肠上皮和炎症浸润区域。

2. Activin A加剧NEC病理进程
   rActivin A处理组小鼠出现更严重的肠壁坏死和炎症评分，伴随ZO-1/Occludin蛋白表达下降40%-60%，而抗Activin A抗体可恢复屏障功能。

3. ALK4-Smad2/3介导凋亡机制
   体外实验显示，ALK4抑制剂SB431542完全阻断Activin A促凋亡效应，WB证实该过程依赖Smad2/3磷酸化，与NF-κB通路无关。

【结论与意义】
该研究首次阐明Activin A-ALK4轴通过Smad2/3依赖性凋亡途径破坏肠屏障，推动NEC进展。临床转化方面，靶向中和Activin A或抑制ALK4可能成为NEC新型治疗策略，尤其对TLR4抑制剂疗效不佳的患儿具有补充价值。团队进一步计划开发ALK4特异性拮抗剂，并探索早产儿患者中Activin A水平的预后价值。