补阳还五汤调控线粒体功能障碍缓解动脉粥样硬化的关键机制：BTK、PREPL与P2RX7蛋白的核心作用

本研究针对传统中药复方多成分、多靶点机制解析的难题，以补阳还五汤（BYHWD）为研究对象，通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS成分鉴定、机器学习筛选关键靶点（BTK/PREPL/P2RX7）及分子动力学模拟，揭示其通过上调PREPL、下调BTK/P2RX7改善线粒体功能，从而缓解动脉粥样硬化（AS）的机制，为中药现代化研究提供范式。

　　

动脉粥样硬化（AS）作为心脑血管疾病的主要病理基础，其发病机制与线粒体功能障碍密切相关。传统中药复方补阳还五汤（BYHWD）在临床中展现出改善AS的潜力，但其多成分、多靶点的特性使得机制解析成为阻碍中药现代化的关键瓶颈。如何系统揭示BYHWD通过调控线粒体功能缓解AS的分子机制，成为亟待解决的科学问题。

淮阴理工学院的研究团队在《International Journal of Biological Macromolecules》发表研究，通过整合UHPLC-Q-TOF-MS/MS（超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱）成分分析、机器学习靶点预测、分子动力学模拟及体内外实验验证，首次阐明BYHWD通过调控BTK、PREPL和P2RX7三个关键靶点改善线粒体功能，从而缓解AS的分子机制。研究采用的主要技术包括：基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS从BYHWD中鉴定57种成分并筛选13种候选化合物；结合差异基因分析（DEGs）、加权基因共表达网络（WGCNA）和机器学习筛选线粒体相关核心靶点；通过分子对接和动力学模拟验证化合物-靶点相互作用；最后利用RAW264.7细胞和小鼠模型进行功能验证。

BYHWD成分分析与活性成分筛选
通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术从BYHWD中鉴定出57种成分，包括黄酮类（如芒柄花素）和三萜皂苷类化合物。经成药性预测筛选出13种候选活性成分，如甲基异甘草素（Methylnissolin）和异芒柄花素（Isomucronulatol）。

核心靶点识别与验证
基于AS患者队列的转录组数据，通过DEGs、WGCNA和机器学习方法锁定BTK（Bruton酪氨酸激酶）、P2RX7（嘌呤能受体P2X7）和PREPL（脯氨酸内肽酶样蛋白）三个与线粒体功能密切相关的靶点。分子对接显示9种BYHWD成分（如甲基异甘草素）与这些靶点具有高结合亲和力，动力学模拟证实复合物稳定性达100纳秒。

体内外功能验证
实验证实BYHWD可显著提升AS模型中线粒体膜电位（JC-1检测）和ATP水平，同时降低活性氧（MitoSOX Red检测）。机制上，BYHWD通过上调PREPL表达促进线粒体生物合成，同时下调BTK/P2RX7抑制炎症通路，从而改善线粒体功能。

该研究不仅首次系统阐明BYHWD通过BTK-PREPL-P2RX7轴调控线粒体功能缓解AS的机制，还筛选出甲基异甘草素等9种关键活性成分。其创新性在于构建了“成分-靶点-功能”多维研究框架，为中药复方机制解析提供了可推广的方法学范式。研究团队特别指出，PREPL作为新发现的线粒体调控靶点，可能成为AS治疗的新突破口。这项成果不仅推动BYHWD的临床转化，也为其他经典方剂的现代化研究提供了重要参考。