腺苷对银环蛇毒早期干预的临床前证据：从传统草药到神经保护机制

本研究针对蛇咬伤这一被忽视的热带疾病，探索了传统草药Pimpinella diversifolia DC及其活性成分腺苷对多种神经毒蛇毒的拮抗作用。通过体内外实验证实，腺苷能显著抑制银环蛇(Bungarus multicinctus)毒液诱导的神经毒性，在48小时内实现100%生存率。该发现为开发经济有效的蛇咬伤替代疗法提供了新思路，尤其对医疗资源匮乏地区具有重要意义。

　　

在热带和亚热带地区的贫困农村，蛇咬伤被称为"最致命的被忽视热带疾病"，每年导致超过10万人死亡。尽管抗蛇毒血清是目前唯一的特效治疗手段，但其昂贵的价格、严格的冷链要求以及高达10-20%的严重不良反应率，使得这一"救命药"在偏远地区往往可望不可及。更严峻的是，中国作为蛇咬伤高风险国家，虽有约60种毒蛇分布，却仅有4种商业化抗蛇毒血清可用。面对这一医疗困境，传统草药Pimpinella diversifolia DC（俗称"蛇倒退"）在民间长期用于解毒的实践经验，引起了研究人员的关注。

中南大学第二湘雅医院的研究团队开展了一项开创性研究，系统评估了P. diversifolia水提取物(WEPD)及其活性成分对多种神经毒蛇毒的拮抗作用。通过液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)分析，研究人员鉴定出10种主要化合物，其中腺苷(adenosine)表现出最显著的神经保护活性。该研究成果发表在《Journal of Advanced Research》上，为开发经济、安全的蛇咬伤替代疗法提供了重要科学依据。

研究采用多项关键技术：通过小鼠急性毒性实验确定WEPD的LD₅₀
；建立3.5×LD₅₀
银环蛇毒致死模型评估治疗效果；利用雏鸡双颈肌(BC)和小鼠膈神经-膈肌(PND)制备研究神经肌肉传导；采用免疫荧光技术观察α-银环蛇毒素与烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)结合情况；通过蛋白质组学分析揭示腺苷的作用机制。

研究结果部分：
"P. diversifolia对多种神经毒蛇咬伤的保护作用"显示，WEPD对银环蛇(B. multicinctus)、金环蛇(B. fasciatus)、中华眼镜蛇(N. atra)和海岸太攀蛇(O. scutellatus)毒液均表现出不同程度的保护效果，其中25 mg/kg剂量对海岸太攀蛇毒的保护率达75%。

"腺苷对银环蛇毒致死性神经毒性的完全保护"部分证实，腹腔注射25 mg/kg腺苷可使银环蛇毒攻击的小鼠全部存活(10/10)，显著优于抗蛇毒血清组。神经毒性评分显示，腺苷治疗组仅10%小鼠出现后肢麻痹和呼吸困难症状，且13小时内完全恢复。

"腺苷对银环蛇毒诱导的突触后神经毒性的影响"通过BC和PND制备实验发现，3 μg/mL银环蛇毒可在19-37分钟内完全抑制神经肌肉传导。预先加入30 μg/mL腺苷可显著减轻这种抑制作用，保护外源性乙酰胆碱(ACh)和氨甲酰胆碱(CCh)诱导的肌肉收缩。

"腺苷调节银环蛇毒中毒的神经毒性和突触功能障碍"显示，腺苷能降低血清中ALP、CK和LDH等肌肉损伤标志物水平。蛋白质组学分析揭示，腺苷通过调控CDC42、PAK3等蛋白，恢复"突触后组织"等通路功能，逆转α-神经毒素对nAChR的阻断作用。

讨论部分指出，银环蛇毒中的α-银环蛇毒素通过阻断突触后nAChR引起非去极化型神经肌肉传导阻滞，是导致呼吸衰竭死亡的主要原因。腺苷作为内源性嘌呤核苷酸代谢物，可能通过激活被毒素拮抗的nAChR，恢复神经肌肉传导。值得注意的是，腹腔注射腺苷显示出优于静脉和皮下给药的效果，可能与腹膜吸收形成的"药物储库"效应有关。

该研究的创新性在于首次科学验证了传统草药P. diversifolia的抗蛇毒活性，并鉴定出腺苷这一关键有效成分。腺苷注射液作为已上市的心血管药物，其重新用于蛇咬伤治疗可大大缩短研发周期，对医疗资源匮乏地区尤为重要。研究也存在一定局限性，如腺苷对其他蛇毒的保护效果有限，腹腔注射在院前急救中的可操作性有待提高。未来研究应聚焦腺苷分子机制，开发更适合野外应用的给药方式，为临床转化奠定基础。