萎蔫程度对红三叶草干草和青贮饲料中植物雌激素浓度、营养价值、微生物种群及体外瘤胃甲烷排放的影响研究

为解决红三叶草(Trifolium pratense L.)因高植物雌激素(phytoestrogens)含量可能引发的反刍动物繁殖障碍问题，研究人员系统评估了萎蔫程度(WET/CUR)与保存方式(干草/青贮)对生物活性成分(如formononetin、biochanin A)及营养指标(NDF、CP)的影响。研究发现，充分萎蔫(CUR)可显著降低青贮中植物雌激素浓度(如formononetin降低21.1%)，同时维持更高的水溶性碳水化合物(WSC)保存率(85.4% vs 47.4%)，为有机牧场饲料安全管理提供了重要依据。

　　

红三叶草作为高蛋白牧草在畜牧业中广泛应用，但其富含的植物雌激素(phytoestrogens)如formononetin和biochanin A，在反刍动物体内代谢后可能产生类雌激素效应。研究表明，当饲料中总植物雌激素超过500-750 mg/kg DM时，可能引发奶牛受孕率下降、胚胎丢失等繁殖障碍。尤其对于依赖牧草的有机牧场，如何平衡饲料营养价值与植物雌激素风险成为行业痛点。

针对这一难题，美国缅因大学的研究团队在《Journal of Dairy Science》发表研究，通过2(萎蔫程度)×2(保存方式)×3(储存阶段)因子设计，系统比较了不同处理对红三叶草品质的影响。研究采用体外瘤胃发酵、原位降解动力学等技术，结合HPLC检测8种植物雌激素，建立了萎蔫程度与营养损失的量化关系。

主要技术方法
实验设置不足萎蔫(WET，干草651 g DM/kg，青贮294 g DM/kg)和充分萎蔫(CUR，干草891 g DM/kg，青贮453 g DM/kg)两组，分别在储存初期(STRT)、14天(EARLY)和稳定期(LATE，干草50天/青贮78天)采样。通过mini-silo模拟青贮发酵，测定营养指标(NDF、NH₃
-N)、微生物计数(酵母/霉菌/LAB)，并采用体外产气系统评估甲烷排放。

研究结果
Red Clover Stand
新鲜红三叶草含formononetin(5130±1692 mg/kg DM)和biochanin A(3751±979 mg/kg DM)，占总植物雌激素的96%。

Nutritional Composition
充分萎蔫使青贮WSC保存率提升至85.4%(vs WET 47.4%)，干草CUR组NDF稳定在476 g/kg DM，而WET组因霉变升至599 g/kg DM。

Phytoestrogens
干草制作使formononetin降低27.1%，青贮CUR组较WET组低21.1%。回归分析显示青贮中NDF与formononetin呈负相关(R²
=0.66)。

In Situ Rumen Degradability
青贮使潜在降解蛋白(B-CP)降低10.2%，但降解速率(K_d
-DM)提高40%，PPO(多酚氧化酶)活性可能是主因。

讨论与意义
该研究首次揭示萎蔫程度对红三叶草植物雌激素动态的差异化影响：干草制作通过延长田间萎?时间促进叶片损失(含较高phytoestrogens)，而青贮中DM>450 g/kg可抑制不良发酵。实践表明，将青贮萎蔫至453 g DM/kg可兼顾营养保存(乳酸71.7 g/kg DM)与植物雌激素控制，为有机牧场制定收割方案提供量化依据。研究还发现，当青贮窖开放时间早于14天时，高DM青贮更易发生有氧腐败，提示实际生产中需平衡安全性与操作可行性。这些发现对改善奶牛繁殖性能、优化低碳饲料策略具有重要指导价值。