RMP通过抑制IKKβ/NF-κB信号通路调控巨噬细胞先天免疫激活的新机制及其在脓毒症治疗中的潜在价值

本研究针对脓毒症中TLR4-NF-κB信号过度激活的临床难题，发现RNA聚合酶II亚基5介导蛋白(RMP)通过招募PP2A磷酸酶形成IKKβ-RMP-PP2A复合物，在静息态巨噬细胞中维持IKKβ去磷酸化抑制状态；当LPS刺激时，RMP被IKKβ磷酸化（Ser439位点）并解离，解除对NF-κB信号的抑制。该研究为脓毒症等炎症性疾病的靶向治疗提供了新策略。

　　

在感染性疾病和脓毒症治疗领域，过度激活的先天免疫反应犹如一把"双刃剑"——虽然对清除病原体至关重要，但失控的炎症风暴却会导致多器官衰竭。其中，TLR4受体触发的IKKβ/NF-κB信号通路是炎症反应的核心开关，但关于其动态调控的分子刹车机制仍存在认知空白。海军军医大学东方肝胆外科医院Shu-jie Pang、Tian-yi Jiang等研究人员在《Cell Communication and Signaling》发表的研究，揭示了RNA聚合酶II亚基5介导蛋白(RMP)作为IKKβ的新型调控因子，为脓毒症治疗提供了潜在靶点。

研究采用转基因小鼠模型（Rmp^flox/flox
; Lyz2-Cre⁺
）结合LPS诱导的内毒素休克和盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症模型，通过流式细胞术、Phos-tag SDS-PAGE磷酸化蛋白检测、表面等离子共振(SPR)等技术，系统解析了RMP在先天免疫中的调控机制。

RMP是LPS诱导NF-κB信号激活的负调节因子
过表达RMP显著抑制LPS刺激下巨噬细胞中IKKβ、P65和IκBα的磷酸化，降低IL-1β、TNFα等炎症因子表达；而THP-1细胞中敲低RMP则增强NF-κB报告基因活性。髓系特异性Rmp敲除小鼠表现出更严重的肺损伤和炎症因子风暴，在LPS和CLP模型中死亡率分别升高40%和50%。

炎症刺激诱导RMP磷酸化修饰
LPS处理15-60分钟内，RMP蛋白出现磷酸化依赖的条带上移，质谱鉴定其Ser439位点为关键磷酸化位点。IKK抑制剂处理可阻断这一现象，证实RMP是IKKβ的直接底物。

IKKβ与RMP形成动态相互作用
免疫共沉淀和GST pull-down实验显示，RMP通过C端结构域（287-531aa）与IKKβ激酶结构域直接结合。磷酸化突变体RMP-S439A与IKKβ结合能力增强，且能更有效抑制NF-κB信号激活。

RMP/PP2A复合物调控IKKβ活性
在静息态巨噬细胞中，RMP作为支架蛋白招募PP2Ab（蛋白磷酸酶2A调节亚基）至IKK复合物，维持其低磷酸化状态；LPS刺激后，磷酸化的RMP-S439从复合物解离，解除对IKKβ的抑制。表面等离子共振证实三者间存在纳摩尔级结合力（K_D
=2.3×10^-8
M）。

该研究首次阐明RMP通过"分子开关"机制动态调控TLR4-NF-κB信号：静息期通过PP2A维持免疫稳态，激活期通过磷酸化解离放行炎症信号。这不仅解释了脓毒症中免疫失衡的分子基础，更提示靶向RMP-IKKβ相互作用界面可能成为新型抗炎策略。特别值得注意的是，RMP在肿瘤中表现促炎作用（如通过NF-κB促进IL-6转录），而在巨噬细胞中发挥抗炎功能，这种细胞类型特异性调控为精准免疫干预提供了理论依据。研究建立的髓系特异性Rmp敲除小鼠模型，为后续脓毒症药物筛选提供了理想工具。