咖啡酸通过调控ERK1/2-AKT-p53通路抑制恶性胸膜间皮瘤增殖并诱导线粒体凋亡的机制研究

（推荐语）本研究首次揭示天然酚酸咖啡酸（CA）通过选择性抑制ERK1/2和AKT磷酸化、上调p53-p21/p27轴引发G2 /M期阻滞，并激活Bax/Bcl-2-caspase-3依赖性线粒体凋亡通路，显著抑制恶性胸膜间皮瘤（MPM）的增殖与迁移。其三维微球模型验证了CA的跨维度抗肿瘤效应，为开发低毒靶向疗法提供新策略。

　　

Abstract
恶性胸膜间皮瘤（MPM）缺乏有效治疗手段，咖啡酸（CA）作为肉桂酸衍生物展现出显著抗癌潜力。研究通过MTT实验证实CA对SPC111和SPC212细胞的IC₅₀
低于肉桂酸（CINN），且选择性指数（SI）达2.74，提示其靶向性优势。

Introduction
CA广泛存在于植物性食物中，既往研究显示其通过氧化应激和表观调控抑制黑色素瘤、乳腺癌等肿瘤生长。MPM的KRAS-MAPK和PI3K/AKT/mTOR通路异常激活与石棉暴露密切相关，而现有化疗方案（顺铂联合培美曲塞）疗效有限。

Materials and methods
采用2D/3D培养模型，通过MTT、流式细胞术（检测Ki67/PCNA）、Western blot（分析p-ERK1/2、p-AKT、Bax/Bcl-2等）及荧光染色（AO/EtBr区分凋亡形态）等多维度评估CA效应。三维微球通过悬滴法构建，直径控制在350-400 μm。

Results

1. 增殖抑制：50 μM CA处理24小时使Ki67和PCNA表达下降40%，克隆形成减少60%（p<0.01）。
2. 信号通路：100 μM CA显著抑制ERK1/2（Thr202/Tyr204）和AKT（Ser473）磷酸化，但对STAT3无影响；3D模型中需200 μM才达到同等效果。
3. 周期阻滞：G₂
   /M期细胞比例从对照组的18%增至52%（p<0.01），伴随p21/p27表达上调3倍。
4. 凋亡诱导：DAPI/PI染色显示100 μM CA组凋亡细胞达65%，Bax/Bcl-2比值升高4.2倍，caspase-3剪切体明显增加。

Discussion
CA通过双重阻断ERK1/2（增殖）和AKT（生存）信号，协同p53-p21/p27轴实现周期阻滞。其线粒体凋亡效应依赖BH3-only蛋白（Bik/PUMA）激活，且三维模型耐药性提示肿瘤微环境的影响。相较于传统化疗，CA在非癌性MeT-5A细胞中毒性阈值（400 μM）远高于MPM细胞（100 μM），具有显著治疗窗口。

展望
需开展PDX模型或转基因小鼠实验验证CA体内药效，并探索其与现有化疗的协同作用。CA衍生物的结构优化可能进一步提升对STAT3通路的抑制效力。