单克隆抗体1C3单药治疗对埃博拉病毒暴露猕猴的部分保护作用及逃逸突变机制研究

本研究首次评估了人源单抗（mAb）1C3作为单药治疗在埃博拉病毒（EBOV）和苏丹病毒（SUDV）致死暴露猕猴模型中的保护效果，揭示其部分保护EBOV感染但无法抵御SUDV的局限性，并通过深度测序发现治疗压力下病毒糖蛋白（GP1,2 ）关键位点（如S119N/R172Q和P124L）的快速逃逸突变，为抗病毒单抗联合策略的必要性提供了直接证据。

　　

摘要

研究团队评估了人源单克隆抗体1C3作为单药治疗在埃博拉病毒（EBOV）和苏丹病毒（SUDV）致死暴露猕猴模型中的保护效果。此前，1C3与1C11的联合疗法已证明对两种病毒均有效，但1C3独特的结合特性（以1:3化学计量比结合GP₁
头部区域）促使研究者探索其单药潜力。结果显示，25 mg/kg剂量（暴露后第4、7天给药）对SUDV完全无效，仅部分保护EBOV暴露猕猴（2/3存活）。值得注意的是，死亡猕猴中检测到GP₁
关键位点（EBOV：S119N/R172Q；SUDV：P124L）的逃逸突变，证实单药治疗易引发快速病毒逃逸。

引言

目前针对丝状病毒病的单抗疗法（如mAb114和REGN-EB3）虽获批用于EBOV，但对高病毒载量患者疗效有限，且SUDV仍无临床级疗法。1C3因其跨物种中和能力（靶向GP₁
保守表位）成为候选，但体外实验已提示其结合位点易突变（如K114G/D117R等）。本研究旨在验证1C3单药的体内保护性及逃逸风险。

结果

生存与临床指标
EBOV组中，1C3治疗组2只猕猴存活（RM 1/2），1只（RM 3）于第8天猝死；SUDV组全部死亡（CEM 1-3），但死亡时间较对照组延迟1-2天。存活个体RM 1出现双相病毒载量峰和后期葡萄膜炎，提示免疫病理风险。

病毒动力学
1C3未能抑制非存活猕猴的病毒血症（EBOV/SUDV载量与对照组相当），而存活者血浆未检出感染性病毒。值得注意的是，RM 3第7天血清完全丧失中和活性，与其体内检测到的逃逸突变同步。

逃逸突变机制
深度测序揭示：

• EBOV死亡个体（RM 3）中，GP₁
  S119N/R172Q突变在脾脏和淋巴结中占比达45%，且突变互斥分布，提示独立进化。
• SUDV组全部死亡个体均出现GP₁
  P124L突变（频率>10%），而对照组<4%。这些位点均位于1C3结合界面，此前体外实验已证实其导致中和逃逸。

讨论

1C3单药的低剂量（25 mg/kg）和靶点可塑性共同促成治疗失败。EBOV中部分保护可能源于宿主差异或病毒特性，但SUDV的完全无效性凸显1C11联合的必要性——后者可弥补1C3的逃逸漏洞。研究还警示：靶向GP₁
非关键功能区（如NPC1结合域远端）的单抗更易诱发耐药。

材料与方法

实验采用猕猴肌肉注射致死剂量病毒（1,000 PFU），通过临床评分、病毒载量检测（RT-qPCR和空斑试验）及全基因组测序（Illumina平台）评估疗效。中和实验使用Vero E6细胞，逃逸突变通过iVAR/LoFreq分析确认。

意义

本研究首次在体内证实丝状病毒对单抗治疗的快速逃逸能力，强调多表位抗体联用策略的不可替代性，为下一代广谱抗病毒疗法设计提供关键依据。