甘草酸通过KLRC2/ZAP70/MAPK通路改善脾虚证的科学机制及天然甜味剂的药用价值

本研究针对传统中药甘草治疗脾虚证的物质基础不明问题，通过构建SD大鼠脾虚模型，首次揭示甘草酸（GA）作为活性成分通过调控KLRC2/ZAP70/MAPK信号通路改善脾虚症状。研究发现GA能下调KLRC2、p-ZAP70、p-MAPK等关键蛋白表达，增强NK细胞毒性，为天然甜味剂的药用开发提供新依据。

　　

研究背景
脾虚证是中医基础病症，现代医学认为其与免疫失调和慢性炎症密切相关。甘草作为"补脾益气"要药，其核心活性成分甘草酸（GA）虽被广泛用作食品甜味剂，但治疗脾虚的分子机制尚未阐明。当前研究面临两大挑战：一是中药多成分协同作用的复杂性导致单体药效物质难以锁定；二是传统甜味剂的药用价值开发缺乏机制研究支撑。

宁夏医科大学的研究团队通过整合转录组学、分子互作验证和动物实验，首次系统解析GA改善脾虚证的靶点通路。研究发现GA通过调控自然杀伤细胞受体KLRC2（NKG2C家族成员）及其下游ZAP70/MAPK信号轴，降低TNF-α和颗粒酶B（GZMB）等效应分子表达，相关成果发表于《Food Bioscience》。

关键技术方法
研究采用SD大鼠脾虚模型（过度疲劳+饮食失节法），通过ELISA检测胃肠激素和炎症因子变化。利用转录组学筛选差异基因，结合分子对接和生物膜干涉技术（BLI）验证GA与KLRC2/ZAP70/GRB2的相互作用。通过NK细胞杀伤实验（K562靶细胞）和蛋白免疫印迹分析关键通路蛋白磷酸化水平。

研究结果
GA-H/GA-M改善脾虚大鼠一般状况
与正常组相比，模型组大鼠出现毛发枯槁、爪耳苍白等典型脾虚症状。GA中高剂量组（160/80 mg·kg^-1
）能显著恢复体重、粪便含水量和握力（P<0.05），且效果优于补中益气丸阳性对照组。

分子机制验证

1. 转录组分析发现KLRC2是GA潜在作用靶点
2. BLI实验证实GA与KLRC2结合解离常数（K_D
   ）达10^-6
   M级
3. KLRC2过表达使NK细胞对K562杀伤率提升37%
4. GA干预后脾虚大鼠p-ZAP70、p-MAPK表达显著下调（P<0.01）

讨论与结论
该研究首次建立"GA-KLRC2-ZAP70-MAPK-TNFα"作用轴，揭示传统甜味剂调控免疫稳态的新机制。发现GA通过抑制NK细胞过度活化减轻脾虚相关炎症损伤，为开发兼具甜味和免疫调节功能的食品添加剂提供理论支持。研究不仅阐明甘草"补脾"功效的科学内涵，更为中药质量标志物（Q-marker）发现提供范例。

应用前景

1. 拓展GA在功能性食品中的应用场景
2. 为慢性疲劳综合征等现代疾病提供潜在治疗策略
3. 推动传统甜味剂从食品添加剂向"药食同源"产品升级