铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌共感染的治疗策略：抗菌谱与联合用药的协同效应研究

这篇研究深入探讨了铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）和金黄色葡萄球菌（S. aureus）共感染的临床挑战，通过表型、基因型和药敏试验筛选敏感及耐药菌株，评估了联合用药（如多黏菌素、利奈唑胺等）对浮游和生物膜（biofilm）共培养的协同效应。结果显示，33.3%的联合方案对耐药菌株浮游态、80%对敏感菌株生物膜具有协同作用，为临床治疗提供了剂量优化依据，同时揭示了共感染中细菌互作的耐药机制。

　　

背景

铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）和金黄色葡萄球菌（S. aureus）的共感染常导致抗生素治疗失败，尤其在慢性伤口、囊性纤维化等疾病中。两者共存时通过竞争或协作改变毒力与耐药性，而生物膜形成进一步加剧治疗难度。本研究旨在探索联合用药对敏感及耐药菌株共培养的抑制效果。

材料与方法

从临床分离的52株P. aeruginosa和43株S. aureus中筛选出强生物膜形成能力的敏感（PA-27/PS-100）和耐药菌株（PA-14/PS-107），通过PCR鉴定耐药基因（如bla_NDM-1
、mecA）和毒力基因（如pslA、icaA）。采用微量肉汤稀释法测定单药及联合用药对浮游态和生物膜的最小抑菌浓度（MIC）与最小生物膜抑制浓度（MBIC），并通过棋盘法计算分数抑制浓度指数（FICI）评估协同性。

结果

浮游态共培养：P. aeruginosa在共培养中表现出竞争性优势，其MIC与单菌培养相近，而S. aureus的MIC显著升高（如四环素耐药性增加>32倍）。联合用药中，多黏菌素（colistin）与利奈唑胺（linezolid，FICI:0.16）、万古霉素（vancomycin，FICI:0.15）等组合对耐药菌株协同率达33.3%。

生物膜共培养：细菌协作导致MBIC普遍升高，仅8.3%的联合方案（如colistin+linezolid）对耐药菌株生物膜有效，而敏感菌株协同率高达80%。值得注意的是，colistin与硝基呋喃妥因（nitrofurantoin）组合使后者的MBIC降低8倍。

分子机制：携带bla_NDM-1
的P. aeruginosa和mecA阳性S. aureus在共培养中通过改变代谢（如藻酸盐分泌）相互保护，而毒力基因（如pvdA、icaA）的共存增强了生物膜稳定性。

讨论

尽管联合用药的协同效应受限于单药敏感性（如colistin对P. aeruginosa固有活性），但MIC的显著降低（≥50%）提示剂量调整的临床潜力。例如，colistin破坏革兰阴性菌外膜后，可促进利奈唑胺等药物进入S. aureus细胞。研究还发现，藻酸盐过度分泌可能介导两菌的“和平共处”，为靶向干预提供新思路。

结论

联合疗法（如colistin+linezolid）能有效应对共感染的复杂耐药性，尤其对生物膜态感染。未来需深入解析协同机制，并评估肾毒性等副作用，以推动现有药物的临床再定位。